甲基化和異戊烯化作用的檢測實驗_羧基甲基化的證實

細胞

甲基甲硫氨酸

SDS-PAGE

1. 用 100 μCi/ml 的 [³H] 甲基甲硫氨酸標記細胞（約 1X10⁷）。

2. 用放射免疫沉淀和 SDS-PAGE 分離目的蛋白。

3. 熒光光譜法觀察，切下蛋白帶，放在一個 0.5 ml 的微型離心管中。

4. 加 100 μl 的蒸餾水，當凝膠片膨脹時，去掉紙支持物。

5. 加 200 μl 的 1 mol/L NaOH 到含有凝膠片的試管中。

6. 立即將試管放到閃爍瓶中，用部分閃爍液填充（在 20 ml 小瓶中加 2.5 ml 即可），擰緊螺帽。

7. 37℃ 保溫 24 小時。

8. 從小瓶中取出試管，再加 7.5 ml 閃爍液，計數樣本的放射性。