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  • 發布時間:2019-04-06 20:17 原文鏈接: 人單核/巨噬細胞的表型檢測

    實驗步驟

    基本方案

    材料

    待 測 單 個 核 細 胞(肝素抗凝血或肝素抗凝骨髓)或 外 周 血 單 個 核 細 胞(單 元 8.1)或者單核/巨 噬 細 胞(單 元 8. 5 , 推薦采用陰性分選)

    PBS

    PBS/肝素:含 0.1% (V/V ) 肝 素 的 PBS

    阻 斷 IgG,濃 度 3 mg/ml (如正常小鼠 IgG, Caltag)

    熒光素標記的單克隆抗體(表 6. 3. 2)

    E M A (Ethidium monoazide) 溶液

    A C K 裂 解 液(新鮮配制,室溫保存應< 1 2 h)

    7 2 % (m /V ) 甲醛

    12m m X 75m m 試管

    15m l 錐 底 塑 料 離 心 管(Falcon)

    低 功 率 白 熾 燈(如 40W 白熾燈)

    Sorvall R T 6000B 離心機和轉子

    la. 使用肝素抗凝血或抗凝骨髓時:在 15m l 錐底塑料離心管中加入約 IOml 抗凝血或1?3ml抗凝骨髓, 4℃, 1500g離心 3min。棄血 漿 ,加入 1 〇ml PBS/肝素,蓋緊

    展開 
    經驗交流


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