1 顯示纖維素的化學方法：植物細胞的細胞壁最主要的成分是纖維素。纖維素在碘和硫酸的作用下變成藍色。在細胞中，纖維素的成分越多，藍色越明顯，而強烈木質化的細胞壁，對纖維素雖然仍能發生上述反應，但因它被木質掩蓋，因此不能作用，而小變藍色。
方法是用 1%碘液（配制方法：先將 1.5g 碘化鉀溶于 100mL 蒸餾水中，待全溶解后，加入 1g 碘，震蕩溶解）滴在材料上，然后再加一滴 66.5%硫酸 (7 份濃硫酸 +3 份蒸餾水），經過這樣處理，纖維素的細胞壁呈藍色反應。
2 顯示木質素的間苯三酚反應：間苯三酚反應是植物顯微化學中檢驗木質化最常用和最簡單的方法。切片先用一滴鹽酸浸透（因間苯三酚在酸性環境下才能與木質起作用），然后滴一滴間苯三酚的乙醇溶液，木質化細胞壁可現出櫻桃紅或紫紅色，其顏色深度取決于細胞壁木質化的程度。此染色法不適于作永久切片，因顏色會慢慢退去而變成淡黃色。
3 顯示栓質和角質的化學方法：栓質和角質均為飽和與不飽和脂肪酸的衍生物，與蘇丹Ⅲ作用呈現橘紅色反應。
4 顯示果膠質的化學方法：果膠質在植物細胞中分布很廣泛，細胞壁胞間層部分甚至全部由果膠質所構成。檢測植物細胞中的果膠質常采用釕紅染色法：切片用 0.02%的釕水溶液染色 30 min, 細胞壁中的果膠成分被染成紅色。另外亦可采用番紅染色法：配0.5%-1.0%番紅水溶液，可將果膠質細胞壁染成橙黃色（木栓質與木質素染成櫻紅色），此染液的缺點是不穩定，易褪色，如將切片用凡士林或石蠟在蓋玻片周圍封閉，置丁 2%繃酸中則能保色幾個月。
5 顯示淀粉粒的碘－碘化鉀反應：淀粉是植物細胞中主要的儲藏物質，它們在各種不同的植物細胞中形成各種不同形狀的顆粒。由于碟與淀粉作用形成碘化淀粉呈藍色反應，因此用碘液測試淀粉已成為最常用的方法。
6 顯示多糖的高碘酸－希夫反應 (PAS 反應）：利用高碘酸（氧化劑）破壞多糖分子中的 C-C 鍵，變為醛基，碘基與希夫試劑（無色亞硫酸復紅）柜結合，生成紅色的反應產物。這一過程稱為 PAS 反應。
試劑配制
(1)0.5%-0.8%高碘酸水溶液。
(2) 希夫試劑：將 1g 堿性品紅溶于 200mL 煮沸的蒸餾水中，搖動 5-10 min, 冷卻到50℃ 時過濾。向濾液中加入 1mol/L 鹽酸 20mL, 冷卻至 25℃, 加 2g 偏亞硫酸鉀（或鈉鹽），搖勻，靜置暗處過夜。加活性炭 2g, 搖動 2-3min, 用濾紙將溶液過濾于棕色細口瓶中。濾液應該是無色或淡黃色，若呈紅色則不能使用。將合格的染液置于黑暗低溫 (0-4℃) 下儲存備用，用前將染液升到室溫。若使偏業硫酸鉀 2-3 倍于堿性品紅，可增強希夫試劑活力。在提高偏亞硫酸鉀用量的情況下，可使堿性品紅變成無色，不用活性炭去色過濾。
(3) 洗滌液：偏亞硫酸鉀（或鈉）溶液
10%偏亞硫酸鉀 5ml,
1mol/L HCI 5mL
蒸餾水 90mL
臨用時將二者混合，使用新鮮混合液。
制片程序
(1)切片脫蠟至蒸餾水； (2) 流水沖洗 15-30 min; (3)0.5%-0.8%高碘酸溶液處理10 min; (4) 流水洗滌 5-10min, 蒸餾水過濾； (5) 移入希夫試劑中 20-30min; (6)用偏業硫酸鉀溶液洗 3 次，每次 2-3 min;(7)流水洗滌 10-15 min, 并通過蒸餾水 5 min;(S)按常規通過各級乙醇脫水，二甲苯透明，樹膠封片。
7 顯示蛋白質的汞-溴酚藍法：蛋白質是構成原生質休的主要成分，也可成為后含物儲藏在細胞內，成為無定形的結晶體或糊粉粒。目前測定糊粉粒最普通的方法是氯化汞-溴酚藍法（試劑配制： 10g 氯化汞 (HgCI2),0.001g 溴酚藍溶于 100mL 蒸餾水中］。將切片滴上此液一滴，染色 5min 后用 0.5%醋酸沖洗，除去切片上多余的染料，再放在培養皿中水洗 5 min, 用甘油封藏觀察。細胞中有糊粉粒則被染成鮮藍色。
8 顯示油、脂肪、揮發油的化學力法：植物解剖中，染脂肪性物質最常用的是蘇丹 III溶液，它有兩個濃度不同的配方：
A 蘇丹 Ill( 或蘇丹Ⅳ) 0.1g
95% 乙醇 10mL
甘油 10mL
B 蘇丹 Ill( 或蘇丹Ⅳ) 0.0lg
95% 乙醇 5mL
甘油 5mL
切片放在上述任一種溶液中染色 24h, 然后用 50%乙醇洗滌，放人甘油中觀察，油脂可染成淡黃色或紅色，同時為了加速染色，可以微微加熱
9 顯示單寧的亞硫酸鐵反應：單寧是一類酚類化合物的衍生物。許多植物細胞中都含有單寧，它存在于細胞質、液泡或細胞壁中。單寧被認為具有保護植物，抗水解、抗腐爛和動物危害的作用將新鮮組織切片投入 0.5%-1.0%的亞硫酸鐵或氯化鐵溶液（用 0.1mol/L HCI 配制）中染色后，可作暫時性封片進行觀察；也可經乙醇脫水，二甲苯透明，制成永久制片。染色結果：若出現藍色沉淀物則表明有單寧存在。
10 顯示 DNA 的孚爾根反應：利用切片經 1mol/L HCl 60℃水解處理后， DNA 的脫氧戊糖間的醛基成為自由狀態。希夫試劑同暴露出來的醛基發生反應，將核的染色質染成深紫紅色。
試劑配制：
(1)1mol/L HCl 。
(2)希夫試劑配法見“多糖的高碘酸－希夫反應”。
(3)偏亞硫酸鈉水溶液（洗滌液）配方見“多糖的高碘酸－希夫反應”。
制片程序
(1)組織經卡諾固定液固定4-8h, 固定時間不宜太長，太長會水解 DNA,減弱染色強度。
(2) 切片脫蠟并逐步過渡到蒸餾水。
(3) 在冷 1mol/L HCl 中 1-2min 。
(4)60℃熱 1mol/L HCl 處理 15 min。
(5) 用冷 1mol/L HCl 略洗。
(6) 蒸餾水漂洗。
(7)希夫試劑反應 1-2h( 暗處）。
(8) 用偏亞硫酸鈉水溶液洗 3 次，每次 3-5mm 。
(9) 流水沖洗 15-30min 。
(10) 蒸餾水漂洗。
(11)各級乙醇脫水，每級 10-15 min。至 95% 乙醇時，可用 0.1%亮綠（或固綠）的 95%乙醇溶液復染 15-60s 。
(12) 二甲苯透明，樹膠封片。 展開 | 