一、材料與設備
1. 植物材料:(1)干小麥種子;(2)發芽的小麥種子;(3)浸濕但未發芽的小麥種子。
2. 儀器與用具:(1)廣口瓶測呼吸裝置一套,(2)托盤天平1架;(3)酸滴定管及堿滴定管各1支;(4)滴管架1套;(5)恒溫水浴鍋1具。
3. 試劑:(1)1N的草酸溶液(每ml 1N草酸相當于1mgCO2);(2)0.1N氫氧化鋇溶液;(3)酚酞指示劑。
二、方法
1. 呼吸強度的測定:
(1)取500ml廣口瓶一個,加一個一孔橡皮塞。孔直徑約1厘米,供滴定用之,平時用一個小橡皮塞塞緊,瓶塞下面掛一鐵絲小籃,以便裝植物材料。整個裝置可稱“廣口瓶測呼吸裝置”。
(2)在瓶中準確加入0.1N的氫氧化鋇溶液20毫升,立即塞緊橡皮塞(不帶小籃)。充分搖動廣口瓶幾分鐘,待瓶內全部CO2被吸收后,拔出小橡皮塞加入酚酞試劑3滴,把滴定管插入孔中,1/22N草酸溶液進行空白滴定,直至紅色剛剛消失為止。
(3)倒出廢液,用無CO2的蒸餾水(煮沸過的)洗凈后,重加同一氫氧化鋇溶液20ml,同時稱取植物材料(發芽的小麥種子)5克,裝入小鐵絲筐中,掛于橡皮塞下,把塞子蓋在瓶上,開始記錄時間,經20-30分鐘,其間輕輕搖動數次,使溶液表面的碳酸鋇薄膜被破壞而利于CO2的充分吸收。到預定時間后,輕輕開塞,把裝有植物材料的小籃子迅速取下立即重新塞緊,充分搖動2分鐘,使瓶中CO2完全被吸收,然后拔出小橡皮塞,加入酚酞3滴,用草酸滴定如前。注意防止口中呼出氣體侵入瓶內。
(4)計算呼吸強度(每克組織每小時放出CO2毫克數):
呼吸強度(毫克CO2/克組織·小時)=
2、不同條件對呼吸強度的影響:
(1)用前面描述過的大小一致的呼吸瓶四個(可四個實驗小組聯合作),進行如上處理:
① 加干種子100粒(小麥或其它種子,以下相同)在30℃恒溫水浴鍋上:
② 加入浸濕種子100粒,在30℃恒溫水浴鍋上;
③ 加催芽種子100粒,在30℃恒溫水浴鍋上;
④ 加催芽種子100粒,在10℃左右室溫下。
(2)30分鐘后,輕輕從呼吸瓶中取出種子,然后用草酸滴定如前,并用下式計算各瓶呼吸強度(100粒種子1小時內放出CO2毫克數):
(3)把不同處理的測定結果記于下表,并加以解釋。
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