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  • 發布時間:2019-04-11 15:05 原文鏈接: 葉綠素的理化性質測定實驗

    實驗方法原理葉綠素是一種二羧酸的酯,可與堿起皂化作用,產生的鹽能溶于水,可用此法將葉綠素與類胡蘿卜素分開。葉綠素與類胡蘿卜素都具有共軛雙鍵,在可見光區表現出一定的吸收光譜,可用分光鏡檢查或用分光光度計精確測定。葉綠素吸收光量子后轉變成的激發態葉綠素分子很不穩定,當它回到基態時,可以發出紅光量子,因而產生熒光。葉綠素的化學性質也很不穩定,容易受強光的破壞,特別是當葉綠素與蛋白質分離后,破壞更快。葉綠素分子中的鎂可被H+所取代而成為褐色的去鎂葉綠素,后者遇到Cu2+可形成綠色的銅代葉綠素,這種葉綠素在光下不易受到破壞,故常用此法制作綠色多汁植物的浸制標本。
    實驗材料

    菠菜葉木瓜葉

    試劑、試劑盒

    95﹪酒精KOH甲醇溶液醋酸醋酸銅粉碳酸鈣石英砂

    儀器、耗材

    天平分光鏡小電爐試管量筒移液管研缽小燒杯漏斗等

    實驗步驟

    1. 葉綠體色素提取

    稱取新鮮葉片2g剪碎于研缽中,加少量95﹪酒精(或80﹪丙酮)和少量CaCO3粉及石英砂,研磨成勻漿,再加95﹪酒精(或80﹪丙酮)l0ml稀釋研磨后,用濾紙過濾于小瓶中,濾液即為葉綠體色素提取液。

    2. 葉綠素的皂化作用(綠色素與黃色素的分離)

    (1) 用移液管吸取葉綠體色素提取液約5ml放入試管中,再加入1.5ml左右20﹪KOH甲醇溶液,充分搖勻。

    (2) 片刻后,加入5ml苯,搖勻,再沿試管壁慢慢加入1~1.5ml蒸餾水,輕輕混勻(勿激烈搖蕩),靜置試管架上,可看到溶液逐漸分為兩層,下層是稀的乙醇溶液,其中溶有皂化葉綠素a和b(以及少量葉黃素),上層是苯


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