高效液相色譜-串聯質譜技術(LC-MS)是采用高效液相分離技術與質譜質量分析串聯技術進行樣品定性定量分析的手段。可以用于（1）不揮發或者極性化合物的成分分析；（2）生物大分子（包括蛋白，多肽，多聚物等）的分析測定；（3）對含量極低到匹克級的成分也可以進行準確的定量。
| 實驗方法原理 | 高效液相色譜-串聯質譜法，即以高效液相色譜為分離手段，以質譜為鑒定和測定手段，通過適當接口將兩者連接成完整儀器。 試樣通過液相色譜系統進樣，由色譜柱分離，而后進入接口。在接口中，試樣由液相中的離子或分子轉變成氣相離子，然后被聚焦于質量分析器中，根據質荷比而分離。最后離子信號被轉變為電信號，由電子倍增器檢測，檢測信號被放大后傳輸至計算機數據處理系統。 |
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| 實驗材料 | 動物源性食品 |
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| 試劑、試劑盒 | 標準品睪酮甲基睪酮黃體酮群勃龍 |
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| 儀器、耗材 | TSQ Quantum三重四極桿串聯質譜儀電噴霧電離源Surveyor AS自動進樣器 |
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| 實驗步驟 | 1. 取樣： 稱取約500 g動物肌肉、肝臟，完全切碎后，勻漿備用；取10枚鮮蛋，去殼，均質備用；取鮮牛奶500 mL，混勻備用。
2. 提取：試樣5 g，置于50 mL離心管中，加入10 %碳酸鈉溶液3 mL和10 mL乙酸乙酯，均質30 s，振蕩10 min（4℃），6000 r/min離心10 min，將上層有機相轉移至梨形瓶中。再用10 mL乙酸乙酯重復提取一次，合并上層有機相。在40℃下，旋轉蒸發至干。用50 %乙腈水溶液1 mL溶解殘余物，溶液冷凍30 min，16000 r/min離心5 min，取適量溶液經0.22μm濾膜過后，供LC/MS/MS法測定。
3. 進樣分析 展開 |
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| 注意事項 | 1. 質譜儀的離子源、質量分析器和檢測器都必須在高真空狀態下工作，以減少本底的干擾，避免發生不必要的離子-分子反應。真空度不夠則會導致靈敏度不夠。
2. LC-MS接口避免進入不揮發的緩沖液，避免含磷和氯的緩沖液，含哪和鉀的成分必須<1mmol/1，鹽分太高會抑制離子源的信號和堵塞噴霧針及污染儀器。
3. 選擇合適的電壓：當DP電壓（去簇電壓）高時，樣品在源內分解或碎裂，也會使得多電荷離子比例低，多聚體也減少。 展開 |
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| 其他 | 1. 離子源的選擇對待測化合物的定性定量分析檢測至關重要，一般來說，中等極性或大極性化合物多選擇電噴霧離子源，而小極性化合物多選擇大氣壓化學電離，小分子化合物也傾向于選擇大氣壓化學電離，電噴霧有利于分析生物大分子或其他分子量大的化合物。
2. 正、負離子模式的選擇：一般原則為正離子適合堿性樣品，可用于乙酸或甲酸對樣品加以酸化，樣品中含有仲氨或叔氨時可優先考慮使用正離子模式。負離子適合酸性樣品，可用氨水對樣品進行堿化。
3.來源于《藥物色譜分析》丁黎主編。 展開 |
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