1. 觀察前的準備
（1）置顯微鏡于平穩的實驗臺上，鏡座距實驗臺邊沿約3—4cm。鏡檢者姿勢要端正，一般用左眼觀察，右眼便于繪圖或記錄，兩眼必須同時睜開，以減少疲勞，亦可練習左右眼均能觀察。
（2）調節光源，對光時應避免直射光源，因直射光源影響物像的清晰，損壞光源裝置和鏡頭，并刺激眼睛。如陰暗天氣，可用日光燈或顯微鏡燈照明。
調節光源時，先將光圈完全開放，升高聚光鏡至與載物臺同樣高，否則使用油鏡時光線較暗。然后轉下低倍鏡觀察光源強弱，調節反光鏡，光線較強的天然光源宜用平面鏡；光線較弱的天然光源或人工光源宜用凹面鏡。
在對光時，要使全視野內為均勻的明亮度。凡檢查染色標本時，光線應強；檢查未染色標本時，光線不宜太強。可通過擴大或縮小光圈、升降聚光器、旋轉反光鏡調節光線。
2. 低倍鏡觀察
檢查的標本需先用低倍鏡觀察，因為低倍鏡視野較大，易發現目標和確定檢查的位置。
將金黃色葡萄球菌染色標本置鏡臺上，用標本夾夾住，移動推動器，使觀察對象處在物鏡正下方，轉動粗調節器，使物鏡降至距標本約0．5cm處，由目鏡觀察，此時可適當地縮小光圈，否則視野中只見光亮一片，難見到目的物，同時用粗調節器慢慢升起鏡筒，直至物像出現后再用細調節器調節到物像清楚時為止，然后移動標本，認真觀察標本各部位，找到合適的目的物，并將其移至視野中心，準備用高倍鏡觀察。
3. 高倍鏡觀察
將高倍鏡轉至正下方，在轉換物鏡時，需用眼睛在側面觀察，避免鏡頭與玻片相撞。然后由目鏡觀察，并仔細調節光圈，使光線的明亮度適宜，同時用粗調節器慢慢升起鏡筒至物像出現后，再用細調節器調節至物像清晰為止，找到最適宜觀察的部位后，將此部位移至視野中心，準備用油鏡觀察。
4. 油鏡觀察
（1）用粗調節器將鏡筒提起約2cm，將油鏡轉至正下方。
（2）在玻片標本的鏡檢部位滴上一滴香柏油。
（3）從側面注視，用粗調節器將鏡筒小心地降下，使油鏡浸在香柏油中，其鏡頭幾乎與標本相接，應特別注意不能壓在標本上，更不可用力過猛，否則不僅壓碎玻片，也會損壞鏡頭。
（4）從接目鏡內觀察，進一步調節光線，使光線明亮，再用粗調節器將鏡筒徐徐上升，直至視野出現物像為止，然后用細調節器校正焦距。如油鏡已離開油面而仍未見物像，必須再從側面觀察，將油鏡降下，重復操作至物像看清為止。
（5）用同樣的方法觀察枯草芽孢桿菌染色標本。
（6）觀察完畢，上旋鏡筒。先用擦鏡紙拭去鏡頭上的油，然后用擦鏡紙蘸少許二甲苯（香柏油溶于二甲苯）擦去鏡頭上殘留油跡，最后再用干凈擦鏡紙擦去殘留的二甲苯。切忌用手或其他紙擦鏡頭，以免損壞鏡頭。用綢布擦凈顯微鏡的金屬部件。
（7）將各部分還原，反光鏡垂直于鏡座，將接物鏡轉成八字形，再向下旋。同時把聚光鏡降下，以免接物鏡與聚光鏡發生碰撞危險。 展開 | 