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  • 發布時間:2019-04-13 12:11 原文鏈接: 堿性磷酸酶染色實驗

    實驗方法原理細胞組織中的堿性磷酸酶在堿性(PH9.0-9.6)環境下使作用液中的底物(a一磷酸萘酚鈉)水解,產生出a萘酚,然后再與偶氮鹽偶聯,生成不溶性的耐曬染料(最終產物的顏色因所用偶氮鹽的品種不同而有所不同).
    試劑、試劑盒

    磷酸萘酚鈉偶氮鹽丙二醇

    實驗步驟

    一、實驗試劑:底物作用液的配制:α-磷酸萘酚鈉35mg,偶氮鹽(FastGsrnet)35mg,0.05M丙二醇(Propcmeliul)緩沖液35ml,配成后可直接過濾到涂片上。

    二、實驗方法:

    l. 涂片在冷的(0土5℃)10%福爾馬林甲醇液中固定30秒.

    2. 蒸餾水沖洗.

    3. 往涂片上滴加底物作用液,在室溫下作用5-10分鐘。

    4. 自來水沖洗10分鐘.

    5. 2%甲綠復染10分鐘。

    6. 水洗,晾干、封固(用甘油)

    三、實驗結果判斷:NAP陽性顆粒為紅色,可采用表內評分,根據100個中性粒細胞胞漿內NAP顆粒的多少進行0-4+計分,再將100個細胞分值相加,即得總積分值,注意,只限于成熟的帶形及多形核中性粒細胞,不計淋巴細胞,嗜酸性和嗜堿性粒細胞。



    注:&middot;指偶氮染料沉積所占細胞漿的百分比

    附注:

    1. 涂片應新鮮,厚薄適宜,及時固定.

    2. 染色液應新鮮配制,注意PH值應以9.4為好.

    3. 每次染色時,最好同時做1份化膿性感染患者血涂片作陽性對照,同時報告待檢者和對照者陽性細胞率和積分值.

    展開


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