不常見革蘭陽性菌的快速鑒定方法

病原學檢測對于感染性疾病的診斷和治療非常重要，因此，臨床微生物實驗室在醫院感染治療和控制中起到關鍵作用。目前，大部分臨床微生物實驗室采用商品化的鑒定系統鑒定臨床分離的細菌，但是對于一些臨床不常見的細菌，傳統的鑒定方法(如革蘭染色、生化反應等)更加實用有效。因此，本文參照CLSI M32-A2文件列舉了一些臨床不常見細菌的特征和鑒定方法，希望對臨床微生物實驗室的常規工作有所幫助。

 一. 不常見革蘭陽性菌

 1．產單核李斯特菌

李斯特菌是一種典型的胞內寄生的革蘭陽性短桿菌，共分為2個群，7個種。第一群包括產單核細胞李斯特菌、伊氏李斯特菌、無害李斯特菌(又名英洛克李斯特菌) 、韋氏李斯特菌及西爾李斯特菌；第二群為較少見的格氏李斯特菌和莫氏李斯特菌。其中產單核細胞李斯特菌和伊氏李斯特菌具有致病性，且產單核細胞李斯特菌是惟一能引起人類疾病的，是一種人獸共患病的病原菌，能引起人、畜的李斯特菌病，感染后主要表現為敗血癥、腦膜炎、流產和單核細胞增多。這種病菌在自然界廣泛存在，食品中存在的產單核細胞李斯特菌對人類的安全具有危險，世界衛生組織(WHO)指出，水產品、奶及奶制品、肉制品均有不同程度的污染，并曾將其列為20世紀90年代食品中四大致病菌之一。

產單核李斯特菌是一種革蘭陽性短小桿菌，通常成雙排列，偶爾可見雙球狀(見圖8)。有鞭毛，但僅在18~20℃有動力，在37℃動力緩慢。無芽胞，一般不形成莢膜，但在含有血清的葡萄糖蛋白胨水中能形成粘多糖莢膜。兼性厭氧，對營養要求不高，普通培養基上可生長，在血平板上會形成β-溶血。最適的生長溫度是30~37℃，并可在4℃條件下進行冷增菌。本菌耐堿不耐酸，對熱較為敏感，加熱50℃10min即可死亡同時該菌對多種抗生素敏感，以氨芐青霉素為首選，尚有青霉素、鏈霉素、四環素、氯霉素和紅霉素等敏感。但該菌對磺胺、桿菌肽和多粘菌素耐藥。產單核李斯特菌觸酶陽性，馬尿酸鹽陽性。

 2．鏈球菌屬

鏈球菌屬細菌廣泛分布于自然界、人和動物腸道、健康人鼻咽部等，致病鏈球菌可引起各種化膿性炎癥、猩紅熱、風濕熱等疾病。本屬細菌為革蘭陽性球菌，鏈狀排列，無鞭毛，無芽孢，可形成莢膜，在液體培養基中易形成長鏈，致病性強的菌株多為長鏈，在膿汁標本中多為短鏈。本屬細菌為需氧或兼性厭氧菌，部分為厭氧菌。營養要求較高，需在加有血液、血清等成分的培養基生長良好。根據鏈球菌在血液瓊脂平板上菌落周圍溶血情況，有草綠色溶血環的稱為α型溶血，如草綠色鏈球菌；呈透明溶血環的稱為β型溶血，稱β溶血性鏈球菌或化膿性鏈球菌；也有不溶血的，稱為γ型溶血，如腸球菌。根據族特異性抗原將鏈球菌分A－T 18個族。鏈球菌屬細菌觸酶陰性。化膿鏈球菌(A群) PYR陽性。無乳鏈球菌(B群) 馬尿酸鹽陽性，CAMP陽性。草綠色鏈球菌PYR陰性，LAP陽性，膽汁溶菌試驗陰性。肺炎鏈球菌鏡下為革蘭陽性球菌，矛尖狀，成雙排列，在人和動物體內形成莢膜，菌落細小、周圍有草綠色溶血環，48小時后，由于菌落自溶，呈現“臍窩狀”，Optochin敏感試驗陽性，膽汁溶菌試驗陽性，菊糖分解試驗陽性。

 表2 不常見革蘭陽性菌快速鑒定方法