實驗概要
本文介紹了彩色免疫金銀染色方法（coloured IGSS，CIGSS）的原理及操作步驟。
實驗原理
彩色免疫金銀染色方法（coloured IGSS，CIGSS）基本原理是在IGSS法的基礎上，根據洗彩色照片的顯影原理而發展起來的，即IGSS后，在抗原位點處生成的銀顆粒經鐵氰化鉀與溴化鉀的氧化反應，將銀顆粒氧化成溴化銀，后者與彩色顯影劑起還原反應，生成金屬銀，而彩色顯影劑本身則被氧化，其氧化產物使彩色成色劑由五色變成有色的染料，并沉積在銀顆粒的部位，金屬銀變成了銀離子。由于染料只能通過彩色顯影劑沉積在有銀的部位，不會發生非特異性背景染色。
實驗步驟
1. 石蠟切片常規脫蠟至水。
2. 0.1%胰蛋白酶37℃消化20min，或抗原修復20min（98℃），自然冷卻至室溫。
3. 0.05mol/L（pH7，4）TBS洗3×3min。
4. 1%EA（卵蛋白）15min，不洗。
5. 適當稀釋的特異抗體室溫4h或4℃孵育20h，或37℃孵育1h。
6. 0.05mol/L（pH7.4）TBS洗3×5min。
7. 0.02mol/L（pH7.4）TBS（內含0.1%BSA）洗10min。
8. 1%EA 15min，不洗，1:10-1:20稀釋的PAGlonm室溫孵育1h，或37℃孵育30min。
9. 0.05mol/L（pH7.4）TBS洗10min。
10. 1%戊二醛洗10min。
11. 雙蒸水洗5min。
12. l%明膠洗5min。
13. 銀避光顯影（見銀顯影劑配方）8~15min。
14. 雙蒸水洗15min。
15. 固定：用顯影定影液（1:4或1:10）固定5min，也可以用15%硫酸鈉-20%硫代硫酸鈉混合液固定1-3min，或用1%戊二醛固定5min，溫水洗3~6min。
16. 漂白：用2%鐵氰化鉀和1%溴化鉀洗10min，雙重蒸餾水洗5min。
17. 彩色顯影：用。-萘酚或菲尼酮或堿性品紅顯色2-4min，雙重蒸餾水洗5~10min。
18. 固定：2%硫代硫酸鈉和1%亞硫酸鈉洗5min。
19. 流水沖洗。
20. 緩沖甘油封片，觀察。