實驗動物給藥途徑和方法

 在動物實驗中，為了觀察藥物對機能功能、代謝及形態引起的變化，常需將藥物注入動物體內。給藥的途徑和方法是多種多樣的，可根據實驗目的、實驗動物種類和藥物劑型等情況確定。

　　（一）皮下注射

　　注射時以左手拇指和食指提起皮膚，將連有5（1/2）號針頭的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、貓多在大腿外側，豚鼠在后大腿的內側或小腹部；大白鼠可在側下腹部。兔在背部或耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。

　　（二）皮內注射

　　皮內注射時需將注射的局部脫去被毛，消毒后，用左手拇指和食指按住皮膚并使之繃緊，在兩指之間，用結核菌素注射器連4(1/2)細針頭，緊貼皮膚表層刺入皮內，然后再向上挑起并再稍刺入，即可注射藥液，此時可見皮膚表面鼓起一白色小皮丘。

　　（三）肌肉注射

　　肌肉注射應選肌肉發達，無大血管通過的部位，一般多選臀部。注射時垂直迅速刺入肌肉，回抽針栓如無回血，即可進行注射。給小白鼠、大白鼠等小動物作肌肉注射時，用左手抓住鼠兩耳和頭部皮膚，右手取連有5（1/2）針頭的注射器，將針頭刺入大腿外側肌肉，將藥液注入。

　　（四）腹腔注射

　　用大、小白鼠做實驗時，以左手抓住動物，使腹部向上，右手將注射針頭于左（或右）下腹部刺入皮下，使針頭向前推 0.5～1.0cm，再以45度角穿過腹肌，固定針頭，緩緩注入藥液（圖1），為避免傷及內臟，可使動物處于頭低位，使內臟移向上腹。若實驗動物為家兔，進針部位為下腹部的腹白線離開1cm處。

圖1　小鼠腹腔注射方法

　　（五）靜脈注射

　　1．兔：兔耳部血管分布清晰。兔耳中央為動物，耳外緣為靜脈。內緣靜脈深不易固定，故不用。外緣靜脈表淺易固定，常用。先拔去注射部位的被毛，用手指彈動或輕揉兔耳，使靜脈充盈，左手食指和中指夾住靜脈的近端，拇指繃緊靜脈的遠端，無名指及小指墊在下面，右手持注射器連6號針頭盡量從靜脈的遠端刺入，移動拇指于針頭上以固定針頭，放開食指和中指，將藥液注入（圖2），然后拔出針頭，用手壓迫針眼片刻。

圖2　家兔耳緣靜脈注射方法

　　2．小白鼠和大白鼠：一般采用尾靜脈注射，鼠尾靜脈有三根，左右兩側及背側各一根，左右兩側尾靜脈比較容易固定，多采用，背側一根也可采用，但位置容易固定。操作時先將動物固定在鼠筒內或扣在燒杯中，使尾巴露出，尾部用45～50℃的溫水浸潤半分鐘或用酒精擦拭使血管擴張，并可使表皮角質軟化，以左手拇指和食指捏住鼠尾兩側，使靜脈充盈，用中指從下面托起尾巴，以無名指和小指夾住尾巴的末梢，右手持注射器連4(1/2)號細針頭，使針頭與靜脈平行（小于30℃），從尾下四分之一處（約距尾尖2-3厘米）處進針，此處皮薄易于刺入，先緩注少量藥液，如無阻力，表示針頭已進入靜脈，可繼續注入。注射完畢后把尾部向注射側彎曲以止血。如需反復注射，應盡可能從末端開始，以后向尾根部方向移動注射（圖3）。

圖3　小鼠尾靜脈注射方法

　　 3．狗：狗靜脈注射多選前肢內側皮下頭靜脈（圖4）或后肢小隱靜脈（圖5）注射。注射前由助手將動物側臥，剪去注射部位的被毛，用膠皮帶扎緊（或用手抓緊）靜脈近端，使血管充盈，從靜脈的遠端將注射針頭平行刺入血管，待有回血后，松開綁帶（或兩手），緩緩注入藥液。

圖4　 狗前肢頭靜脈注射

圖5　狗后肢小隱靜脈注射

　　4．蛙（或蟾蜍）：將蛙或蟾蜍腦脊髓破壞后，仰臥固定于蛙板上，沿腹中線稍左剪開腹肌，可見到腹靜脈貼著腹壁肌肉下行，將注射針頭沿血管平行方向刺入即可（圖6）。

圖6 蛙腹壁靜靜注射

　　幾種常用的動物不同給藥途徑的注射量可參考表1。 

表1　幾種動物不同給藥途徑的常用注射量（毫升）

　　（六）淋巴囊注射

　　蛙類常采用此法，因其皮下有數個淋巴囊，注入藥物甚易吸收。腹部淋巴囊和頭背淋巴囊常作為蛙類給藥途徑。一般多選用腹部淋巴囊給藥。注射時將針頭從蛙大腿上端刺入，經大腿肌層入腹壁肌層，再進入腹壁皮下，即進入淋巴囊，然后注入藥液。有時也可采用胸淋巴囊給藥。方法是將針頭刺入口腔，使穿過下頜肌層入胸淋巴囊內注入藥液，一次最大注射量為1毫升。蛙全身分布為咽、胸、背、腹側、腹、大腿和腳等七個淋巴囊（圖7）。

圖7　 蛙全身淋巴囊分布

　　（七）經口給藥

　　在急性試驗中，經口給藥多用灌胃法，此法劑量準確，適用于小白鼠、大白鼠、家兔等動物。

　　1．小鼠、大鼠（或豚鼠）用輸血針頭或小號腰穿針頭，將其尖端斜面磨劑，用焊錫在針尖周圍焊一圓頭，注意勿堵塞針孔，即成灌胃針；亦可用燒成圓頭的硬質玻璃毛細管或特制的塑料毛細秋，作為導管。灌胃時將針按在注射器上，吸入藥液。左手抓住鼠背部及頸部皮膚將動物固定，右手持注射器，將灌胃針插入動物口中，沿咽后壁徐徐插入食道。動物應固定成垂直體位，針插入時應無阻力。若感到阻力或動物掙扎時，應立即停止進針或將針拔出，以兔損傷或穿破食道以及誤入氣管。

　　一般當灌胃針插入小鼠3－4cm，大鼠或豚鼠4-6cm后可將藥物注入。常用的灌胃量小鼠為0.2-1ml，大鼠1-4ml，豚鼠為1-5ml。

　　2．狗、兔、貓、猴 灌胃時，先將動物固定，再將特制的擴口器放入動物口中，擴口器之寬度可視動物口腔大小而定，如狗的擴口器可用木料制成長方形，長約10-15cm，粗細應適合狗嘴，約2-3cm，中間粘一小孔，孔的直途為5-10cm。灌胃時將擴口器放于上述動物上下門牙之后，并用繩將它固定于嘴部，將帶有彈性的橡皮導管（如導尿管），經擴口器上的小圓孔插入，沿咽后壁而進入食道，此時應檢查導管是否正確插入食道，可將導管外口置于一盛水的燒杯中，如不發生氣泡，即認為此導管是在食道中，未誤入氣管，即可將藥液灌入。

圖8　狗灌胃方法

　　經我們大量實驗，給狗、兔等動物灌胃時，可不用擴口器也能順利將藥液灌入胃內，狗灌胃時，用12號灌胃管，左手抓住狗嘴，右手中指由右嘴角插入，摸到最后一對臼齒后的天然空隙，胃管由此空隙順食管方向不斷插入約20cm，可達胃內，將胃管另一端插入水中，如不出氣泡，表示確已進入胃，而沒誤入氣管內，即可灌入。兔灌胃時，將兔固定在木制固定盒內左手虎口卡住并固定好兔嘴，右手取14號細導尿管，由右側唇裂避開門齒，將導管慢慢插入，如插管順利，動物不掙扎，插入約15cm時，即表示插入胃內，將藥液注入。

　　各種動物一次灌胃能耐受的最大容積小鼠為0.5-1.0ml，大鼠4-7ml，豚鼠為4-7ml，家兔為80-150ml，狗為200-500ml。

　　（八）其它途徑給藥

　　1．呼吸道給藥　呈粉塵、氣體及蒸氣或霧等癥狀存在藥物或毒氣，均需要通過動物呼吸道給藥。如一般實驗時給動物乙醚作吸入麻醉，給動物吸一定量的氨氣、二氧化碳等觀察呼吸、循環等變化；給動物定期吸入一定量的SO₂。鋸末煙霧等可造成慢性氣管炎動物模型等；特別在毒物學實驗中應用更為廣泛。

　　2．皮膚給藥　為了鑒定藥物或毒物經皮膚的吸收作用、局部作用、致敏作用和光感作用等，均需采用經皮膚給藥方法。如家兔和豚鼠常采用背部一定面積的皮膚脫毛后，將一定藥液涂在皮膚上，藥液經皮膚吸收。

　　3．脊髓腔內給藥　此法主要用于椎管麻醉或抽取腦脊液。

　　家兔椎管內注射方法：將家兔作自然俯臥式，盡量使其尾向腹側屈曲，用粗剪將第七腰椎周圍背毛剪去，用3%碘酊消毒，干后再用79%酒精將碘酒擦去。在兔背部髕骨脊連線之中點稍下方摸動第七腰椎間隙（第七腰椎與第一骶骨椎之間），插入腰椎穿刺針頭。當針到達椎管內時（珠網膜下腔），可見到兔的后肢跳動，即證明穿刺針頭已進入椎管。這時不要再向下刺，以兔損傷脊髓。固定好針頭，即可將藥物注入。

　　4．小腦延髓池給藥　此種給藥都是在動物麻醉情況下進行的。而且常采用大動物如狗等，小動物很少采用。將狗麻醉后，使狗頭盡量向胸部屈曲，用左手摸到其第一頸椎上方的凹陷（枕骨大孔），固定位置，右手取7號鈍針頭（將針頭尖端麻鈍），由此凹陷的正中線上，順平行狗的方向，小心地刺入小腦延髓池。當針頭正確刺入小腦延髓池時，注射者會感到針頭再向前穿時無阻力，同時可以聽到很輕的“咔嚓”一聲，即表示針頭已穿過硬腦膜進入小腦延髓池，而且可抽出清亮的腦脊液，注射藥物前，先抽出一些腦脊液，抽取量根據實驗需要注入多少藥液決定，即注入多少抽取多少，以保持原來腦脊髓腔里的壓力（圖9）。

圖9　狗小腦延髓池給藥

　　5．腦內給藥　此法常用于微生物學動物實驗，將病原體等接種于被檢動物腦內，然后觀察接種后的各種變化。小鼠腦內給藥時，選套有塑料管、針尖露出2mm深的5(1/2)針頭，由鼠正中額部刺入腦內，注入藥物或接種物。給豚鼠、兔、狗等進行腦內注射時，須先用穿顱鋼針穿透顱骨，再用注射器針頭刺入腦部，再徐徐注入被檢物。注射速度一定要慢，避免引起顱內壓急驟升高。

　　6．直腸內給藥　此種給藥方法常用于動物麻醉。家兔直腸內給藥時，取灌腸用的膠皮管或用14號導尿管代替。在膠皮管或導尿管頭上涂上凡士林，由助手使兔蹲臥于桌上，以左臂及左腋輕輕按住兔頭及前肢，以左手拉住兔尾，露出肛門，并用右手輕握后肢，實驗者將橡皮管插入家兔肛門內，濃度約7～9cm，如為雌性動物，注意勿誤插入陰道（肛門緊接尾根）。橡皮管插好后，將注射器與橡皮管套緊，即可灌注藥液。

　　7．關節腔內給藥　此種方法常用于關節炎的動物模型復制。兔給藥時，將兔仰臥固定于兔固定臺上，剪去關節部被毛，用碘酒或酒精消毒，然后用手從下方和兩旁將關節固定，把皮膚稍移向一側，在臏韌帶附著點處上方約0.5厘米處進針。針頭從上前方向下后方傾斜刺進，直至針頭遇阻力變小，然后針頭稍后退，以垂直方向推到關節腔中。針頭進入關節腔時，通常可有好象刺破薄膜的感覺，表示針頭已進入膝關節腔內，即可注入藥液。動物最大給藥量可參考表2。

表2　常用實驗動物的最大給藥量和使用針頭規格