信號通路研究工具
促細胞分裂原活化蛋白激酶(MAP kinase)是一類絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，由于不同的細胞外刺激或介導細胞表面至細胞核的信號轉導而被激活。 結合其它信號途徑，它們能夠改變轉錄因子的磷酸化狀態。受控的MAPK級聯反應系統參與細胞增殖和分化，但當其活力失控時會導致腫瘤。
據報道，三種主要的MAPK級聯反應類型在哺乳動物細胞中與不同的上游信號協同反應。現今研究最廣泛的級聯反應系統是ERK1/ERK2 MAPK。一般激活的過程包括受體酪氨酸激酶被一些生長因子（例如EGF）激活，為應答蛋白Grb2提供結合位點，Grb2隨即將Sos蛋白定位于質膜上。Sos通過GTP與GDP的交換激活Ras蛋白。Ras-GTP直接與Raf（一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶）相結合，形成一個短暫的膜錨定信號。 活化的Raf激酶磷酸化一個雙重特異性激酶MEK的第218位絲氨酸和第222位絲氨酸。 MEK也可以被Mos以及MEKK1磷酸化，前者是一個在卵母細胞減數分裂成熟過程中表達的蛋白激酶。 一般認為MEK1結合ERK，磷酸化一個絲氨酸或者酪氨酸殘基，然后二者解離。單磷酸化的ERK再結合一個激活的MEK1，二次磷酸化最終達到完全活化。 活化的MEK磷酸化ERK1/ERK2的Thr183和Tyr185(TEY Motif結構)。
| ERKs活化后的主要靶蛋白是pp90核糖體S6激酶 (Rsk)和細胞質磷脂酶A2。 ERK也會轉移到細胞核中磷酸化轉錄因子ELK-1(Ser383和Ser389)。近期另一個相關的細胞核蛋白激酶ERK3已被克隆。它和ERK1/ERK2的催化中心有50%的同源性， 但它不磷酸化任何特有的ERK底物。細胞中往往只有一種ERK1或ERK2的高度活化形式(雙重磷酸化)存在，比非磷酸化ERK活性高出1000倍還多。任何時候細胞中都存在三種未完全活化的ERK，一種以未被磷酸化的酶形式存在，另兩種是單磷酸化的酶，即只含有一個磷酸化的絲氨酸或酪氨酸殘基。 |  |
JNK/SAPK (c-Jun氨基末端激酶/應激激活性蛋白激酶)級聯系統會由于紫外線照射、熱休克或炎癥刺激而被激活。這一類MAPK反應受Rac和Cdc42兩類小G蛋白的調節。活化的Cdc42結合PAK65蛋白并激活它。14 活化的PAK65能夠結合MEKK，然后磷酸化Ser219和Ser223 ，從而激活SEK/JNKK。活化的SEK/JNKK磷酸化JNK/SAPK(TPY Motif結構)，依次結合到c-Jun的N末端并磷酸化Ser63和Ser73。ERK和JNK的磷酸化位點保守，然而，這些位點定位在不同的特異性雙重磷酸化Motif (JNK在TPY Motif，ERK在TEY Motif)。分子克隆研究表明在JNK/SAPK和典型的MAPK之間約有40-45%的序列同源性。
p38蛋白激酶 (再活化激酶)是MAPK家族的最新成員。 它可因炎癥刺激、內霉素和滲透壓而激活。 它和ERKs有50%的同源性。 p38反應過程的上游步驟尚不清楚。但它被一個雙重特異性激酶MKK3磷酸化后(TGY Motif)方開始下游反應步驟。p38活化后轉移到細胞核內，磷酸化ATF-2。20 p38的另一個已知靶物是MAPKAPK2，它參與熱激蛋白的磷酸化和激活作用。
雖然不同的MAPK級聯反應系統有很大區別，功能獨立，但在這些通路之間也有所交匯。例如，JNKK（JNK/SAPK激酶）據報道可以激活p38， 但MKK3只活化p38而不活化JNK/SAPK。MEKK1在JNK/SAPK級聯系統中催化SEK/JNKK1，對催化p38只有微弱的作用。在上游信號中，Sos只催化ERK通路，對JNK或p38級聯反應沒有任何作用。另一個重要發現是當用促有絲分裂劑處理哺乳動物細胞時，ERKs活性顯著增強而JNK/SAPK不受影響。相反，細胞受到脅迫時，只會活化JNK/SAPK通路而ERKs活性不受改變。在轉錄水平，ATF-2可以被三種MAP蛋白激酶磷酸化從而激活，而C-Jun和Elk-1只被ERKs和JNK/SAPK磷酸化。所有三種通路都針對某種特定外界壓力對轉錄活性起作用。
MAPK信號通路研究相關的激活劑
| 產品名稱 | 貨號 | 說 明 | 包裝 | 價格 |
| Anisomycin,Streptomycesgriseolus | 176880 | 高效的激活哺乳動物細胞JNK/SAPK和p38 MAPK激活劑；作為有效信號激活劑與生長因子一起協同誘導c-Fos和c-Jun；抑制翻譯過程中的蛋白合成；誘導U937細胞（人組織淋巴瘤細胞系）凋亡。 | 10mg | 61.0 |
| AurintricarboxylicAcid | 189400 | 抑制多種因子造成的不同類型細胞凋亡；DNA拓撲異構酶II的有效抑制劑；促進MAPK、Shc蛋白、PI 3激酶和PLC-g的酪氨酸磷酸化；有效抑制血管生成，增加angiostatic steroid活性；并可抑制calpain的兩種亞型（m-calpain IC50＝22mm, m-calpain IC50=10）。 | 100mg | 45.0 |
| Palytoxin,Palythoatoxica | 506438 | 源于海葵的非蛋白毒素，皮摩爾級濃度的分子即可損傷細胞；對可興奮細胞和非興奮細胞均可產生多重效應；在Swiss 3T3纖維原細胞中激活SAPK/JNK通路；去極化心臟及平滑肌的興奮細胞，增加胞內Ca2+濃度；與鈉、鉀泵結合從而抑制Na+、K+-ATP酶活性，促進K+外流；也是陽離子載體和非TPA腫瘤促進因子。 | 25ug 100ug | 232. 3650.6 |
| D-erythro-Sphingosine,N-Acetyl- | 110145 | 具生物活性和細胞滲透性的非生理性神經酰胺類似物；抑制HL-60細胞生長、誘導凋亡；促進核小體DNA降解；激活HL-60人早幼粒細胞的SAPK；異三聚體PP2A的激活劑；濃度為100nM時激活T9細胞中的胞質Ser/Thr蛋白磷酸酶。 | 5mg | 98.7 |
| D-erythro-Sphingosine,N-Hexanoyl- | 376650 | 具生物活性和細胞滲透性的非生理性神經酰胺類似物；誘導細胞周期阻滯；活化MAPK；濃度為10nM時激活PP2A；抑制纖維原細胞中甘油二酯累積，抑制磷脂酶D的活性；誘導Molt-4白血病細胞凋亡并增強angiostatic steroid 活性。 | 5mg | 82.8 |
| D-erythro-Sphingosine,N-Octanoyl- | 219540 | 內源神經酰胺的類似物，為具細胞滲透性的短鏈；可誘導多種細胞系凋亡；在HL-60細胞系中激活MAPK。 | 5mg | 82.8 |
| Sphingosylphosphoryl-choline | 567735 | 去乙酰基鞘磷脂衍生物，已知在神經性A型尼曼匹克癥（niemann-pick）中累積；在Swiss 3T3細胞系中快速誘導p125FAK和樁蛋白的酪氨酸磷酸化并導致MAPK短暫活化；促進細胞分裂，通過部分非PKC依賴的路徑增加細胞內游離Ca2+濃度和花生四烯酸含量。 | 10mg | 217.8 |
| Tumor NecrosisFactor-a, Human, Recombinant, E,coli | 654205 | 通過與白細胞分葉核、T細胞、產生抗體的B淋巴細胞、纖維原細胞以及骨髓造血細胞相互作用激活多種免疫反應機制；其活力沒有種屬特異性；激發SAP激酶活性；誘導人嗜中性細胞以及內皮細胞的凋亡；提高血管平滑肌中的iNOS濃度水平；參與一些急、慢性疾病的病理過程。 | 10ug | 370.3 |
| AG126 | 658452 | 阻斷脂多糖誘導的p42 MAPK蛋白底物的酪氨酸磷酸化；抑制脂多糖誘導的TNF-a合成和鼠類腹膜巨嗜細胞內一氧化氮的合成。 | 5mg | 129.2 |
| Apigenin | 178278 | 在低濃度（12.5mm）時誘導v-H-ras-transformed NIH 3T3細胞系表型轉換的恢復，多數通過抑制MAPK活性起作用；通過將惡性腫瘤細胞阻斷于G2/M期從而抑制其增殖并促進形態分化。 | 5mg | 46.5 |
| Hsp25 Kinase Inhibitor | 385880 | 13個氨基酸殘基的小肽，高效選擇性抑制哺乳動物的熱休克蛋白（Hsp25）激酶[又稱MAPKAP kinase-2]；對多肽底物為競爭性抑制（Ki=8.1mm），對ATP為非競爭性抑制（Ki=134mm）。 | 1mg | 120.5 |
| Hypericin | 400076 | PKC的抑制劑(IC50=3.3mM)，同時也可抑制酪蛋白激酶II(IC50=6nM)，MAPK(IC50=4nM)，胰島素受體和EGF受體的酪氨酸激酶活性(IC50：胰島素受體=20-29nM，EGF受體=35nM)，也有報告認為它可抑制PI-3激酶活性(IC50=180nM) | 1mg | 140.9 |
| 5-Iodotubercidin | 407900 | MAPK ERK2 (Ki=530nm)的競爭性抑制劑；同時也是腺苷激酶（Ki=30nM），酪蛋白激酶I，PKA以及胰島素受體激酶（IC50=0.4-28mm）的抑制劑。 | 1mg | 155.4 |
| MAP KinaseAntisenseOligonucleotide | 454858 | 17-mer 硫代磷酸酯寡聚脫氧核苷酸，依據p42和p44 MAPK（ERK2和ERK1）中的一段序列合成；在3T3 L1纖維原細胞和脂肪細胞中降低p42和p44 MAPK的表達水平，此作用為濃度依賴性。 | 25nmol | 315.1 |
| MAP KinaseAntisenseOligonucleotideControl | 454859 | 17-mer 硫代磷酸酯寡聚脫氧核苷酸，與MAP K反義寡聚核苷酸（貨號454858）的核苷組成相同但順序不同；不影響MAPK的表達和活性。 | 25nmol | 315.1 |
| MAP Kinase Inhibitor Set | 444180 | 包括5mg MEK抑制劑PD98059（貨號513000），各1mg的MAPK抑制劑SB 202190（貨號559388）和 SB 203580（貨號559389），以及1mg的陰性對照SB 202474（貨號559387）。 | 1set | 400.8 |
| MEK Inhibitor Set | 453710 | 包括5mg PD 98059（貨號513000），1mg U0126（貨號662005），以及1mg陰性對照U0124（貨號662006）。 | 1set | 242.5 |
| Olomoucine | 495620 | 嘌呤衍生物，選擇性抑制p34cdc2/細胞周期蛋白B（IC50＝7mM）和一些相關激酶，包括p33cdk2/細胞周期蛋白A（IC50＝7mM），p33cdk2/細胞周期蛋白E（IC50＝7mM），p33cdk5/P35（IC50＝3mM），以及p44 MAPK（IC50＝25mM）；競爭結合激酶的ATP結合位點；對于p34cdk4/細胞周期蛋白D（IC50 >1mM）和p40cdk6/細胞周期蛋白D3（IC50>250mM） 具有較低的靈敏度。 | 1mg 5mg | 45.0 185 |
| PD 98059 | 513000 | MEK選擇性抑制劑，具細胞滲透性；通過抑制MAPK活性和磷酸化MAPK底物起作用；用PD98059預處理PC-12細胞系，能完全阻止由神經生長因子（NGF；IC50＝2mM）引發的MAPK活性增加；不影響依賴于NGF的pp140trk受體或其底物Shc的酪氨酸磷酸化，不阻止依賴于NGF的PI 3激酶的激活。 | 5mg | 117.6 |
| PD 169316 | 513030 | p38 MAPK選擇性抑制劑（IC50＝89nM），具細胞滲透性；可阻止神經元和非神經元細胞因營養因子消除而產生的細胞凋亡。 | 1mg | 130.7 |
| P38 MAP KinaseInhibitor | 506126 | 高效p38激酶抑制劑（IC50＝35nM）。 | 500ug | 130.7 |
| SB 202190 | 559388 | p38 MAPK抑制劑，具細胞滲透性；抑制p38磷酸化髓磷脂堿性蛋白MAP，不影響ERK或JNK MAPK活性；抑制p38b（IC50＝350nM）和p38磷酸化激活轉錄因子2（ATF-2;IC50＝280nM）。 | 1mg | 130.7 |
| SB 202190,Hydrochloride | 559393 | p38 MAPK抑制劑SB 202190（貨號559388）的水溶形式。 | 1mg | 130.7 |
| SB 202474 | 559387 | MAPK抑制研究中的陰性對照。 | 1mg | 133.6 |
| SB 203580 | 559389 | p38 MAPK高度特異性抑制劑（IC50＝600nM），具細胞滲透性；抑制MAPKAP激酶2活性；阻止由于IL-1，細胞脅迫，細菌內毒素誘導產生的熱休克蛋白27（Hsp27）的磷酸化；但不抑制MAPK同源物JNK或p42 MAPK。 | 1mg | 130.7 |
| SB 203580，Hydrochloride | 559395 | MAPK抑制劑 SB 203580（貨號559389）的水溶形式。 | 1mg | 130.7 |
| SB 203085，Iodo- | 559400 | p38 MAPK高度特異性抑制劑，與SB203580（貨號559389）的效果相似；可用于識別p38 MAPK的抑制劑結合位點。 | 1mg | 133.6 |
| SB 220025 | 559396 | 人類p38 MAPK的高效特異性抑制劑（IC50＝60nM）；對p38 MAPK的選擇性高于ERK（p42/p44 MAP 激酶）2000倍，高于PKA500倍，高于PKC50倍，高于EGFR1000倍；也可作為血管生成和TNF-a產物的抑制劑。 | 500ug | 194.6 |
| SC 68376 | 565625 | p38 MAPK高效特異性抑制劑（IC50＝2-5mM），具劑量依賴性。 | 1mg | 159.7 |
| SKF-86002 | 567305 | 雙環咪唑CSAID，通過抑制p38 MAPK以及LPS促生的IL-1和TNF-a產物（IC50＝1mM）的活性來阻止滲透壓和紫外線造成的細胞凋亡；抑制環加氧酶和5-脂加氧酶，抑制滲透壓。 | 5mg | 165.5 |
| U0124 | 662006 | MEK抑制劑U0125（貨號662008）和U0126（貨號662005）的陰性對照，即使濃度達到100mM也不抑制MEK活性。 | 1mg | 91.5 |
| U0125 | 662008 | 特異性抑制MEK（MEK1和MEK2）；雖然與U0126（貨號662005）結構相似，但效用低10倍。 | 1mg | 91.5 |
| U0126 | 662005 | 高效特異性抑制MEK1（IC50＝72nM）和MEK2（IC50＝58nM）；對于MEK底物ATP和ERK的抑制是非競爭性的；作為免疫抑制劑，阻止IL-2合成和T細胞增殖，對T細胞活性和耐受性無長期影響。 | 1mg | 88.6 |
| ZM 336372 | 692000 | 抑制SAPK2a/p38a（IC50＝2mM）和SAPK2b/p38b2（IC50＝2mM）；有效抑制c-Raf（IC50＝70nM）。 | 1mg | 169.9 |
MAPK信號通路研究相關的底物 產品名稱貨號說 明包裝價格JNK Substrate，C-Jun（1-79）420108在E.coli 中以GST融合蛋白形式表達的c-Jun(1-79)活性結構域；JNK/SAPK的高度特異性底物；不被p42 MAPK或p38磷酸化；可用于定性定量檢測JNK活性。100ug305c-Jun(1-79)-GST, HumanE.coli,Recombinant,Agarose Conjugate42010950％瓊脂糖凝膠純化的c-Jun；c-Jun(1-79)-GST(貨號420103)可與GST瓊脂糖結合，用于從細胞抽提物中親和純化SAPK，所結合的SAPK的磷酸轉移酶活性可用隨后添加的g-32P-ATP測定。 100ug482.1MAP Kinase substrate,Tyrosine Hydroxylase 24-3345486024-33個殘基的酪氨酸羥化酶，類似于MAPK的磷酸化位點，自身包含Ser31磷酸化位點；以三氟醋酸鹽形式提供。1mg209.1Myelin Basic Protein Peptide Substrate475920p44mapk(ERK1)和p42mapk(ERK2)激酶的底物；對應于髓磷脂堿性蛋白質的94-102位氨基酸殘基，包含可被MAPK識別的一致序列Pro-X-(Ser/Thr)-Pro；Thr97被激酶磷酸化；以三氟醋酸鹽形式提供。 1mg222.2PHAS-I, Rat,Recombinant516675117個氨基酸殘基的蛋白底物，為MAPK、p38、PKC和JNK極好底物；磷酸化胰島素促增的PHAS-1，不影響脂肪細胞激活cAMP；是MAPK在體內和體外的極好底物。250ug305 |
| JunN-TerminalKinase,Rat,Recombinant | 420105 | 經E.coli表達純化的重組鼠骨骼肌JNKb；參與由紫外線輻射、熱休克、磷酸化導致的蛋白合成抑制以及c-Jun增強轉錄活性等脅迫信號引起的細胞反應；其他JNK的可能底物包括ATF2和P53；用于鑒別JNK的底物和JNK上游激活劑；能夠自身磷酸化。 | 20ug | 518.4 |
| MAP Kinase,Mouse,Recombinant,E.coli | 454850 | 接收信號，在從細胞表面酪氨酸激酶受體到細胞質和細胞內容物的蛋白激酶級聯系統的最后一步起作用；與MEK共表達，被磷酸化后活化。 | 2000U | 341.3 |
| MAP Kinase,Activated,Rat,Recombinant,E.coli | 454855 | 無活性的MAPK(貨號454852)經體外磷酸化產生的具高度活性的形式；可以標記MAPK底物，也可用于抑制劑篩選和顯微注射；帶多聚組氨酸融合尾巴，幫助從反應混合物中轉移MAPK。 | 5ug | 518.4 |
| MAP Kinase,Non-Activated,Rat,Recombinant,E.coli | 454852 | 適用于測定MAPK激活劑的活性，例如MEK在細胞裂解物或色譜純化組分中的活性；帶多聚組氨酸融合尾巴，幫助從反應混合物中轉移MAPK。 | 20mg | 518.4 |
| MAP kinase,ERK1-GST.TagTM, Human,Recombinant,Agarose Conjugate | 442673 | 50%瓊脂糖凝膠純化的人重組ERK1；以GST融合蛋白形式表達，可被吸附到GST瓊脂糖膠上；ERK1和牛凝血酶(貨號604980，20units/ml的勻漿)一起孵育可被釋放，或用10mM的谷胱甘肽洗脫ERK-GST釋放ERK1；可作為ERK1和ERK2的底物。 | 100ug | 482.1 |
| [Ala71]-MAPKinase ERK1,Inactive,Human,Recombinant,Agarose Conjugate | 442674 | 50%瓊脂糖凝膠純化的[Ala71]-ERK1；ERK1的Lys71變換為丙氨酸，成為可起催化作用的MAPK的非活化形式不會自磷酸化或磷酸化其它蛋白質；適用于作為底物定量檢測MEK1和MEK2。 | 100ug | 482.1 |
| p38,GST.TagTM,Mouse,Recombinant | 506122 | 與酵母高滲透性甘油蛋白(HOG1)高度同源(52%同源性)，可調節酵母滲透信號；重組p38可磷酸化ATF2和PHAS-1(貨號516675)，但不磷酸化c-Jun(1-79)(貨號420108)；據報道可磷酸化凝血酶促生的血小板中的PLA2；也在炎癥反應和細胞凋亡中起重要調節作用。 | 50ug | 479.2 |
| SEK1(K129R)-GST.Tag TM,Mouse,Recombinant,E.coli, AgaroseConjugate | 563101 | 50%瓊脂勻漿；MEKK的底物和Anti-SEK1(貨號563103)的蛋白印記標準品。 | 100ug | 482.1 |
(以上價格均為美元價，系默克公司）