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  • 發布時間:2019-05-18 20:04 原文鏈接: 微量加樣器的質量控制

       微量加樣器是微量酶免疫測定中加樣時必用的設備,其使用和校準對酶免疫測定結果有直接的影響,以下對如何正確地使用微量加樣器及其校準等進行介紹:

           1. 加樣器的使用

           1.1 吸液 標準吸液步驟如下:

           1.1.1 把按鈕壓至第一停點;

           1.1.2 垂直握持加樣器,使吸頭浸入液樣中,浸入液體深度視型號而定(見附表)

           不同加樣器允許浸入液體深度

           1.1.3 緩慢、平穩地松開按鈕,吸液樣。等一秒鐘,然后將吸頭提離液面。用藥用吸紙抹去吸嘴外面可能附著的液滴,小心勿觸及吸頭口。

           1.2 放液

           1.2.1 將吸頭口貼到容器內壁并保持10-40傾斜。

           1.2.2 平穩地把按鈕壓到第一停點。第一秒鐘后再把按鈕壓至第二停點以排除剩余液體。

           1.2.3 壓住按鈕,同時提起加樣器,使吸頭貼容器壁察過。

           1.2.4 松開按鈕。

           1.2.5 按吸頭彈射器除去吸頭(只有改用不同液體時才需要更換吸頭)。

           1.3 預洗 當裝上一個新吸頭(或改變吸取的容量值)時應預洗吸頭,先吸入一次液樣并將之排回原容器中。預洗新吸頭能有效提高移液的精確度和重現性。這是因為第一次吸取的液體會在吸頭內壁形成液膜,導致計量誤差。而同一吸頭在連續操作時液膜相對保持不變,故第二次吸液時誤差即可消除。

           1.4 致密及粘稠液體的吸取 對于密度高于水的液體,可將容量計的讀數調到低于所需值來進行補償。例如:用P20移液器轉移10ml血清。先將讀數調到10ml,吸取后以重量法測定。如實測體積為9.5ml,即偏差0.5ml并重復一次。如第二次測定仍不夠準確,根據偏差再作調整。排放致密或粘稠液體時,宜在第一停點多等一二秒鐘再壓到第二停點。

    1.5 加樣器吸頭 加樣器吸頭是整個移液系統的有機組成部分,對其基本要求是,必須有高機械、熱力學和化學穩定性,且純度高,生產過程純凈,無有機或化學物質(如染料)和重金屬污染。選擇密封良好的環口、薄壁和嘴口尖細的吸頭,將使得在加樣時,吸頭的安裝或卸脫更加容易。吸頭管壁有彈性,加樣吸液時不會產生旋渦,如此加樣的精度就更高。吸頭嘴口無毛刺,表面光潔平滑,使得其沾濕性極小,可避免液體留外壁引起的誤差。吸頭應與加樣器上吸頭套筒密封完好,可防止由于空氣泄漏而造成加樣精度或準確度的誤差。此外,吸頭還應有液體容積刻度線。D200吸頭在20ml和100ml處有標記;D1000吸頭在300ml處有標記,D10吸頭在2ml處有標記。最后,吸頭應可在121℃1Pa壓力下消毒20min。如果在使用加樣中,想絕對避免樣品與樣品、樣品與加樣器或樣品與操作人員之間的污染,建議使用Diamond帶濾芯吸頭。Diamond帶濾芯吸頭可以經高溫消毒,其內置濾芯不會損壞。

           2. 加樣器的校準

           加樣器容量性能的鑒定,可依據國際標準化組織(ISO)文件ISO/DIS8655和國家技術監督局頒發的有關定量、可調移液器的中華人民共和國國家計量檢定規程《定量、可調移液器試行檢定規程》(JJG646-90)規定的重量測試方法。這是目前用于此類儀器有效的校準方法。

           加樣器校準標準操作規范

           2.1 適用加樣器范圍 各種品牌、型號的固定、可調和多通道加樣器。

           2.2 校準環境和用具要求

           2.2.1 室溫20-25℃,測定中波動范圍不大于0.5℃。

           2.2.2 電子天平:放置于無塵和震動影響的臺面上,房間盡可能有空調。稱量時,為保證天平的濕度(相對濕度60%-90%),天平內應放置一裝有10ml蒸餾水的小燒杯。

           2.2.3 小燒杯:5-10ml體積。

           2.2.4 測定液體:溫度為20-25℃的去氣雙蒸水。

           2.3 選定校準體積 ①擬校準體積;②加樣器標定體積的中間體積;③最小可調體積(不小于擬校準體積的10%)。如為固定體積加樣器,則只有一種校準體積。

           2.4 校準步驟

           2.4.1 將加樣器調至擬校準體積,選擇合適的吸頭。

           2.4.2 調節好天平。

           2.4.3 來回吸吹蒸餾水3次,以使吸頭濕潤,用紗布拭干吸頭。

           2.4.4 垂直握住加樣器,將吸頭浸入液面2-3mm處,緩慢(1-3s)一致地吸取蒸餾水。

           2.4.5 將吸頭離開液面,靠在管壁,去掉吸頭外部的液體。 

    2.4.6 將加樣器以30角放入稱量燒杯中,緩慢一致地將加樣器壓至第一檔,等待1-3s,再壓至第二檔,使吸頭里的液體完全排出。

           2.4.7 記錄稱量值。

           2.4.8 擦干吸頭外面。

           2.4.9 按上述步驟稱量10次。

           2.4.10 取10次測定值的均值作為最后加樣器吸取的蒸餾水重量,按蒸餾水在不同溫度及氣壓下的重量與體積的換算因子計算體積。然后,按校準結果調節加樣器。

           2.5 加樣器的維護保養程序

           加樣器應根據使用頻率進行維護,但至少應每3個月進行一次,具體方法如下:

           2.5.1 一般維護可用中性洗滌劑清潔,或者用60﹪的異丙醇,然后用蒸餾水反復洗滌,去除洗滌劑或異丙醇,晾干。清潔后活塞處可使用一定量的潤滑劑。

           2.5.2 如果有液體進入加樣器內的嚴重污染,可將加樣器拆開后進行清潔,具體拆開步驟參照加樣器說明書。

           2.5.3 高壓消毒,有的加樣器的吸管部分可高壓消毒,但需注意的是消毒時不可超溫超時,也不能擠壓放置,以免造成變形。

           2.5.4 可調式移液器在不使用時應妥善地豎立放于支架上,遠離潮濕及腐蝕性物質。

           2.5.5 在移液操作過程中為防止液體進入加樣器套筒內,必須注意:壓放按鈕時保持平穩;加樣器不得倒轉;吸頭中有液體時不可將加樣器平放。

           2.5.6 每天開始工作之前應檢查移液器的外表面是否有灰塵或污物,若有則小心抹去。

     


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