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  • 發布時間:2019-07-06 22:45 原文鏈接: 巴傲得生物WB實驗流程

    凝膠濃度與蛋白質分離范圍

    凝膠濃度% (W/V)

    最適分離范圍(KD)

    7.5

    70-200

    10.0

    50-150

    12.0

    30-100

    15.0

    12-45

    20.0

    4-30

    不同濃度分離膠的制備(兩塊膠)

    組分

    7.5

    10

    12

    15

    20

    Tris-HCL緩沖液*

    3.75ml

    3.75 ml

    3.75 ml

    3.75 ml

    3.75 ml

    蒸餾水

    7.28 ml

    6.03 ml

    4.95 ml

    3.45 ml

    1.0ml

    丙烯酰胺溶液,30﹪**

    3.75 ml

    5.0 ml

    6.0 ml

    7.5ml

    10.0ml

    SDS10

    150.0μl

    150.0μl

    150.0μl

    150.0μl

    150.0μl

    過硫酸胺,10

    150.0μl

    150.0μl

    150.0μl

    150.0μl

    150.0μl

    TEMED

    15.0μl

    15.0μl

    15.0μl

    15.0μl

    15.0μl

    1.5mol/L Tris-HCLpH8.8

    **29.2g丙烯酰胺,0.8g甲撐雙丙烯酰胺/100ml水。

    4﹪濃縮膠的制備(兩塊膠)

    組分

    體積

    Tris-HCL緩沖液*

    1.25 ml

    蒸餾水

    3.05 ml

    丙烯酰胺溶液,40

    0.67ml

    SDS10

    50μl

    過硫酸胺,10

    50.0μl

    TEMED

    10.0μl

    0.5mol/L Tris-HCLpH6.8

      試劑

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