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  • 發布時間:2019-07-18 10:22 原文鏈接: 食品中沙門氏菌的檢測方法

    生吃西紅柿等新鮮的時蔬水果是再平常不過的事了。然而,2008年6月在美國中西部和南部30個州,卻有數百人因生食了從超市或是餐館購買的新鮮西紅柿而出現發燒、腹瀉、腹痛等癥狀,其中有幾十人因病情嚴重需住院,甚至有重癥病人死亡 。這就是2008年發生的“西紅柿事件”,不僅使美國人驚恐不已,也引起了世界各國的普遍關注。

    是誰在背后作怪?經調查發現,引發這場事件的元兇并非是一種罕見的致病菌,而是一種極為常見的病原菌,沙門氏菌。沙門氏菌到底為何物?為什么西紅柿中也會出現沙門氏菌,還會引起大規模的中毒事件呢?目前可以采用哪些手段來檢測食品中是否存在沙門氏菌呢?

    什么是沙門氏菌?

    沙門氏菌是由科學家Salmon在一百多年前發現,是一類危害人和動物健康的重要致病菌,其菌屬型別繁多,抗原復雜。自1885年由科學家Salmon和Smith首次分離出豬霍亂沙門氏菌以來,已經從人和動物中分離出67個菌群、2000多個血清型和變種,其中最為普遍的是腸炎沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌和豬霍亂沙門氏菌。據相關資料顯示,沙門氏菌廣泛存在于自然界,對外界環境有一定的抵抗力,在水、牛奶、肉類和蛋類制品中可存活數周至數月,在糞便中可存活1~10個月。

    沙門氏菌有何危害?

    據世界衛生組織的報告,1985年以來,在世界范圍內由沙門氏菌引起的已確診的人類患病人數顯著增加,在一些歐洲國家已增加五倍以上。據資料統計,在我國內陸地區,由沙門氏菌引起的食物中毒屢居首位。而在引起沙門氏菌中毒的食品中,90%以上是肉類等動物性產品。動物性產品中含有多種豐富的營養成分,非常適宜于沙門氏菌的生長繁殖,人們一旦攝入了含有大量沙門氏菌(105~106個/g)的動物性產品,就會引起細菌性感染,進而在毒素的作用下發生食物中毒。

    有醫學研究表明,沙門氏菌引起的食物中毒一般在5~10月份最易發生,并且沙門氏菌引起的食物中毒與食物中沙門氏菌含量、致病力以及個體易感性等因素有很大關系。當人們食入含有沙門氏菌的食品后,菌體和菌體產生的毒素可能造成嘔吐、腹瀉、發燒及頭痛等不良反應,嚴重的甚至可能危及生命,對人體有很大的危害。

    食品中沙門氏菌的檢測方法有哪些?

    沙門氏菌菌型繁多,已確認的沙門氏菌有 2500個以上的血清型。繁雜的各類生化反應型,使常規檢驗程序復雜繁瑣、耗時費力,不僅給檢驗部門帶來沉重的負擔,而且還使生產部門產品運轉和倉貯的時間延長,費用增加。因此,多年來,建立快速而準確的檢測方法一直是沙門氏菌檢驗研究的核心問題。目前,主要采用傳統標準檢測方法、分子生物學方法和免疫學方法等快速檢測法。

    傳統的檢測方法(國標法)

    GB4789.4-2010《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗》中規定的微生物檢驗法是目前世界各國普遍接受的標準方法。這種方法總體可分為 5 個步驟,預增菌、選擇性增菌、分離培養、生化鑒定及血清學分型鑒定。雖然該方法是迄今為止最確實的方法,但由于沙門氏菌血清型繁多,生化特性各異,檢驗程序復雜,耗時長,至少需要 4~7d才可得到準確的檢測結果。

    分子生物學方法

    近年來,分子生物學技術逐步應用于食品中沙門氏菌檢測,它包括擴增片段長度多態性技術(AFLP)、聚合酶鏈反應技術(PCR)、核酸探針等,其中應用最為廣泛的是聚合酶鏈反應技術(PCR)。聚合酶鏈式反應(PCR)是一種體外酶促基因擴增技術.可在短時間內將靶DNA(或RNA)擴增數百萬倍。PCR和DNA探針雜交聯合使用來檢測食品中沙門氏菌.具有特異性強、靈敏度高及操作簡便、快速等特點。但是,其費用較高、操作復雜、操作中的殘留污染易導致假陰性和假陽性,而且需要專用儀器設備,對基層檢驗人員來說可操作性較差,無法成為通用的檢測方法。

    免疫學方法(快速檢測法)

    目前對沙門氏菌檢測大多采用細菌分離、生化鑒定等傳統方法,過程煩瑣、費時費力,并且腸桿菌科細菌間的生化反應多有交叉,因此,傳統檢測方法在快速、敏感與特異性等方面有自身的局限性;分子生物學檢測方法雖然具備敏感性高、特異性強、快速、準確等優點,但是費用高,易污染,對操作環境要求較高,不適用于現場快速檢測。隨著社會發展與科技進步,免疫學檢驗方法和手段不斷涌現,這些檢測方法的檢測結果與傳統檢測方法大體一致,能夠快速、可靠的檢測出食品中的沙門氏菌。

    免疫學方法是利用抗原-抗體反應的顯著特異性,來進行細菌的鑒別和血清學定型。已經建立的沙門氏菌免疫學檢測方法有許多種,大致可分為以酶聯免疫吸附(ELISA),熒光抗體染色(疫熒光法),同位素標記抗體(放射免疫試驗)等,其中酶聯免疫吸附(ELISA)應用較為普遍。免疫學法不但經濟實用、重現性好、靈敏度高、特異性較強,特別是近幾年發展的免疫測試片,不僅適用于防疫及衛生監督部門,還可在企業及家庭衛生檢測中使用。

    目前,沙門氏菌測試片,具有將微生物的分離與鑒定合二為一、特異性強等優點,運用免疫學技術將顯色培養基制成方便使用的測試紙片,從而達到快速、方便、經濟、無需昂貴設備的目的,適用于食品中沙門氏菌的快速初篩。


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