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  • 發布時間:2019-08-29 09:54 原文鏈接: 微生物實驗室日常工作規范

    一、微生物檢測意識


    樹立正確的無菌觀念和檢測人員的素質,是每一個微生物檢測人員應具備的素質,好的修養素質和積極的工作態度是保證結果準確的基礎,下面的規定規范都是為檢測服務的,如果檢測人員沒有好的素質,這些規定都是虛設,擺設;希望下面的規范是每位檢測人員想要做得,而不是強加在自己身上的緊箍咒。

     

    ①增強自己得生物安全意識,如何保護自己,如何保護樣品,如何無菌操作,有責任心。

     

    ②實驗原理,實驗原理是實驗的精髓,掌握它,就能夠對整個實驗更好的了解深入,學習研究。

     

    ③實驗條件的把握,對實驗的每個條件是否掌握清楚,實驗的關鍵控制點是否清楚。

     

    ④實驗結果的把握,一個實驗結果的出現,首先應該自我分析,并且具備這種分析能力,對異常如何處理或是進一步驗證。

     

    ⑤具備研究好學心態,檢測工作是一個相對只是含量較高的職業,高科技飛速發展的今天,許多當時的先進技術不久就陳舊落后,檢測工作也一樣,優秀的化驗員總是虛心好學,善于研究,總是處在科技的前沿。

     

    ⑥人員素質,積極向上,樂于助人,對工作負責,工作第一等,努力提高自己的工作質量。

     

     

    二、微生物檢測


    1.實驗前的準備

    1.1無菌間

    無菌間是微生物實驗的重要環節,關系到實驗結果的準確性,無菌間的使用規范要嚴格要求,保證實驗環境影響因素降到最低。

     

    使用要求:

    1、無菌間在使用前,必須先進行清理、臭氧殺菌時間50min或紫外燈殺菌30min。

     

    2、檢測使用的器皿、樣品等物品的進出,通過緩沖窗進行傳遞,使用完畢后紫外燈殺菌30min,開傳遞窗時禁止兩邊同時打開。

     

    3、檢測人員進入緩沖間后,先更換拖鞋、佩帶無菌帽和一次性口罩,更換衣服,并將其擺放整齊,方可進入無菌間。

     

    4、進入無菌室過程中,依次打開和關閉各緩沖間的門,以避免空氣流通帶入外界的雜菌。

     

    5、無菌操作前必須使用75%酒精對手部進行消毒,接種有害菌種時必須戴手套。

     

    6、進行接種所用的吸管,平皿及培養基等必須經嚴格消毒滅菌,打開包裝未使用完的器皿,不能放置后再使用,金屬用具應高壓滅菌或用95%酒精點燃燒灼后使用,剪刀、鑷子至少每周進行一次高壓滅菌。

     

    7、從包裝中取出吸管時,吸管尖部不能觸及外露部位,使用吸管接種于試管或平皿時,吸管尖不得觸及試管或平皿邊。

     

    8、接種樣品、轉種細菌必須在酒精燈前操作,接種細菌或樣品時,吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒。

     

    9、接種環或針在接種細菌前應經火焰燒灼全部金屬絲,必要時還要燒到環和針與桿的連接處,接種結核菌和烈性菌的接種環應在沸水中煮沸5min,再經火焰燒灼。

     

    10、吸管吸取菌液或樣品時,應用相應的橡皮頭吸取,不得直接用口吸。

     

    11、檢驗結束后,所有帶菌的培養基、試劑、稀釋液和器皿必須盡快清理出無菌間滅菌洗刷。

     

    12、檢驗結束后,人員離開無菌間前,須將無菌間的衛生徹底清理、并用紫外燈進行殺菌。

     

    13、無菌間所用工器具(剪刀、鑷子、膠頭、涂抹棒、托盤盒等)使用完畢后,擺放整齊。

     

    14、滅菌后的無菌間懸掛“已滅菌”標識,正在使用的無菌間要懸掛“使用中”標識。防止檢測人員在未經過滅菌的無菌間中進行微生物檢測。

     

    其它注意事項:

    1.  禁止在無菌間內打手機,由于業務需要可在緩沖間內打手機。

     

    2.  實驗過程中穿著整齊,不要出現露頭發、鼻孔等現象,禁止在無菌間打鬧、喧嘩。

     

    3.  實驗過程中,物品要擺放整齊,實驗產生的垃圾要單獨存放不要亂放,防止污染實驗樣品。

     

    4.  紫外燈每周五打掃衛生時要用酒精棉球擦拭,防止灰塵阻擋影響殺菌效果。

     

    1.2實驗器具

    實驗器具是微生物實驗的一個關鍵控制點,實驗器具的無菌是保證實驗結果準確的重要因素。

     

    ①培養皿,首先應確認是否經過消毒,確認后進行外觀檢查,觀察是否有破損,有破損處廢棄。滅過菌的平皿最多保存一周時間。打開的平皿整齊的擺放到實驗臺上備用,發現有破裂的平皿應廢棄;使用時看是否有平皿內部存有雜質、培養基等異物也應立即廢棄。


    玻璃器皿,新購置玻璃器具因含有游離堿,應在清潔液或2%鹽酸內浸泡24小時,再用蒸餾水清洗。檢驗沾染的油跡、污濁物等器具可用10%NaOH浸泡1小時后,用清水沖洗干凈。每周洗刷盛生理鹽水的三角瓶子,防止水垢太厚影響滅菌和微生物生長。


    實驗完畢后,使用的實驗器具應立即清洗消毒,防止微生物增長污染或者傷害到人員。所有衛生用具如拖把、掃帚、抹布、垃圾桶等都要根據污染區、清潔區、無菌區要求嚴格區分開、并專用,不得相互混淆,衛生用具每周定量用1:20次氯酸鈉液消毒浸泡、清洗、涼干,以免污染。

     

    在進行各種檢驗時,應避免污染;遇有場地、工作服等污染時,應立即處理,防止細菌擴散以免造成污染。凡吸過菌液的吸管或滴管或染菌的培養皿,應立即放入盛有消毒液的容器內或高壓滅菌處理。工作人員必須每天堅持做好環境衛生工作,防止灰塵飛揚,定期對整個操作環境進行消毒。

     

    1.3藥品的使用

    微生物藥品是微生物實驗的一個關鍵控制點,培養基質量的關系到檢測結果準確的重要因素。

     

    ①藥品的采購,實驗藥品缺少時,由藥品管理員上計劃。微生物藥品常規藥品按“箱”進行計算,不常用藥品按“瓶”進行計算,生化鑒定管按“支”進行計算,每種保留至少1個單位庫存量。

     

    ②藥品取用,藥品取用時到藥品管理員取鑰匙,取用后將藥品柜鎖死,并將鑰匙歸還給藥品管理員。取用人員發現藥品低于1個單位庫量時,及時通知藥品管理員。

     

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