方案1 蛋白質和多肽 MALDI-MS 分析的一般方法
方案2 反相微型層析柱的制備實驗
方案3 固定化酶微型層析柱的制備
方案4 用于蛋白質組分析的微毛細管 HPLC 色譜及 ESI —體化裝置的制備和使用
方案5 利用 Nano-LC 耦聯 MS/MS 分析復雜蛋白質混合物實驗
方案6 利用多維蛋白質鑒定技術分析復雜蛋質混合物
方案7 二維色譜和質譜結合分離多肽混合物:離線方法
方案8 通過肽的半胱氨酰化捕獲蛋白質
方案9 蛋白質的同位素親和標簽實驗
方案10 定量蛋白質組學的體內蛋白質同位素標記實驗
方案11 利用脫水胰酶親和捕獲蛋白質實驗
方案12 應用分子掃描器進行蛋白質組分析實驗
方案13 利用化學印刷法進行肽質量指紋圖譜分析實驗
實驗材料 | 冷凍干燥樣品 |
---|---|
試劑、試劑盒 | 校準標準品 基質溶液 甲醇 |
儀器、耗材 | MALDI 質譜儀 MALDI 板 |
實驗步驟 |
1.吸取 0.5ul 的基質溶液,加到 MALDI-MS 分析所用的金屬樣品板上的樣品孔中(為了準確起見,請使用2ul 的移液器)。
2.在基質干燥之前,迅速加入 0.5ul 的標準品或樣品到基質中。
3.置于室溫條件或 40℃ 的烘箱內約 5 min,讓溶劑蒸發以使樣品干燥。
4.把金屬板轉移到質譜儀的真空艙內。
5.以恰好高于離子化閾值的激光能量來「預熱」校準標準品,從而獲得初始質量圖譜。
6.然后,降低激光能量直到獲得高質量的圖譜。
7.用適合的校準物來獲得線性的兩點(two—point) 外標校準(參考表 8.9 和表 8.10)
8.對未知樣品重復步驟 5 和步驟 6, 并與校準值相比較以獲得精確的質量。
9.使用完畢后,用水徹底沖洗 MALDI 板以除去任何可見的晶體,然后再用無棉絨薄紙(例如,Kimwipes 紙)沾甲醇擦拭。
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