方案一
方案二
方案三
| 實驗方法原理 |
單級質譜測序是分析肽段的階梯序列，即相鄰肽段間相差一個氨基酸殘基，用質譜分析肽階梯，通常用 MALDI-TOF,MS 分析。 MS/MS 測序用的是上文所述用于數據庫檢索的 CID 譜，但碎片離子由人工完全解析。 用于MS 序列分析的肽階梯是由化學或酶法降解肽段產生，由 C 未端或N未端斷裂。測定N末端序列的化學方法應用Edman化學反應，用MS或 MS/MS 讀出產生的變短的肽。這一方法通常被稱為“階梯測序＇。在這種方法上發展了兩種變化方式。 |
|---|---|
| 實驗材料 | 蛋白樣品 |
| 儀器、耗材 | 質譜儀 |
| 實驗步驟 |
第一種方法是任每一測序循環開始時，在多肽／蛋白質底物內加 Edman 試劑，每一個循環中有一小部分的底物袚 N 末端封閉，末端封閉后的肽在下一個循環中不會參加反應，這祥就產生了序列階梯，最終反應產物混合物經 MALDI-MS 分析，其質量數之差反映了氨基酸殘基的質量數。 |
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