馬爾文表征蛋白質和生物分子穩定性

方案優勢

DSC是一種用于表征蛋白質和其他生物分子穩定性的強大分析工具， 測量溶液中熱誘導結構躍遷的焓（ΔH）和溫度（Tm）。 該信息讓我們能夠深入了解使蛋白質、核酸、膠束復合體和其他大分子系統穩定或失去穩定性的影響因素。 數據用來預測貨架期、制定純化策略、表征和評價蛋白質構建體或其他生物治療性實體，并用來在小分子藥物發現項目中對配體到蛋白質靶的親和力進行排名。 高通量、高靈敏度的MicroCal VP-Capillary DSC系統的特點是：其軟件可通過簡化的實驗設置和靈活的儀器調度來簡化工作流程。 自動化的數據分析和改進的數據分類功能有助于舒緩分析瓶頸，將典型實驗的數據分析時間由數日減少為幾個小時。

采用標準

測量類型:溫度中點Tm測量類型:焓?H測量類型:熱容變化?CpSample capacity:576（六個96-孔板）樣品量:370μL樣品池容積:130μL樣品展示選件:96-孔板Sample capacity:50個樣品 / 24小時（自動系統）Cell material:鉭樣品池:毛細管Noise:0.05 μCal/°CTypical sample concentration:0.1 - 2.0mg/ml溫度范圍:-10°C ~130°CMaximum scan rate:240oC/hResponse time:5s（高反饋）Multiple feedback modes:是（被動, 高增益，低增益）Automated upgrade available:是Baseline repeatability:1.5μCal/°CCell to cell heat compensation:功率反饋Self contained pressuring system:0 ~45 psi重量:25kg電源功率:100-240V, 50/60Hz, 70W尺寸 （寬, 長, 高）：:1010mm x 680mm x 700mm 運行環境 Operating temperature (°C):10°C ~28°C濕度：:0% ~70% 相對濕度，無冷凝

方法/原理/步驟

　　馬爾文MicroCal VP-Capillary DSC系統專門用于通過差示掃描量熱法(DSC)篩選多種樣品的熱躍遷中點(Tm)和其它熱力學參數。整個過程利用自動進樣器、控制軟件和分析軟件實現自動化。

　　溶液中的生物分子在其自然(折疊)構象和變性(去折疊)構象之間保持平衡。測得的熱躍遷中點(Tm)可提供快速、簡易的穩定性指示。Tm值越大，生物分子越穩定。

　　測量原理

　　由蛋白質和其他大分子形成的清晰結構經歷溫度誘導的構象變化，如去折疊。這些變化造成非共價鍵重新分配,從而導致熱吸收。差示掃描量熱儀測量這種熱量的吸收。

　　Prod-VP-DSC_1

　　MicroCal VP-Capillary DSC的熱核心包括參比池和樣品池，均封裝在一個絕緣夾套中。該裝置設計成始終保持兩池處于相同溫度。測量過程中，參比池和樣品池同時以恒定的掃描速率加熱。樣品分子去折疊時，吸收熱量，在樣品池和參比池間形成溫差(ΔT)。這就形成了整個帕帖爾單元內的熱梯度，建立起成比例的電壓，然后轉化成動力形成一個到加熱器的反饋回路，將DT(溫差)恢復至0。

　　例如，由于蛋白質去折疊是一個吸熱事件，在信號中觀察是一個正位移(熱容)。該“溶解”躍遷的中點為Tm，曲線下的面積就是該過程的焓(ΔH)。

　　有關數據分析和測得/導出參數的詳細描述，請參見技術頁面。