微量全血間接熒光染色法流式細胞術樣本制備實驗

1. 取肝素或EDTA抗凝全血（100μl/份），置12×75mm專用塑料試管中。

2. 加入50μl特異的單克隆抗體（一抗），室溫下孵育30min。

3. 置Q-PREP儀上溶解紅細胞，穩定和固定白細胞。

4. 離心（800～1000rpm，5min）棄上清液，用PBS洗滌細胞2次。

5. 加入50μl熒光（FITC或PE）標記的第二抗體，室溫下避光染色30min。

6. 上流式細胞儀檢測。

1. 新鮮全血一般室溫下放置8小時以內可以使用，時間過長會使活性降低，影響測定結果。

2. 抗凝血應保證無血塊凝集。

3. 全血加入試管中時，應盡量避免加到試管壁上，如沾到了管壁上必須用用棉簽擦凈，否則會影響細胞二維點圖的細胞群的分離效果。