1、合理的實驗室分區
2、實驗操作流程:
(1)樣品制備區進行樣品處理,核酸提取;
(2)配液區配置反應體系:酶混合液和PCR反應液混合,分裝至PCR反應管;
(3)樣品制備區加樣:樣品核酸和陰陽性對照加至反應液中;
(4)PCR擴增區上機擴增檢測。務必保持單向操作流程,避免各區實驗室污染。
3、各個實驗區內試驗用品專區專用
配液區是最潔凈的試驗區域,樣品制備區的潔凈度稍差, PCR擴增區內是最易被污染的區域,各區之間試驗物品專區專用,避免因交叉使用造成實驗室污染。
4、試驗操作要規范
(1)正確使用移液槍,保證試劑配比和計量正確,同時避免液體吸入移液槍口造成污染。
(2)實驗的過程中應勤換手套,在進出不同區域或進行模板操作后,都應及時更換手套。
(3)試劑盒各組分在打開之前應先做瞬時離心(約10s),將管壁及管蓋上的液體甩至管底部,從而減少污染手套或加樣器的機會。開管動作要輕,以防管內液體濺出或形成氣溶膠,造成污染。
(4)樣本量較多時,應將反應液預混,再分裝至PCR反應管,最后添加核酸模板,以減少單個添加操作繁瑣造成的污染。
(5)每次試驗必須設定陰性對照和陽性對照,讀取結果時,在保證陰陽性對照均成立的情況下,判讀樣本結果才有效。
(6)實驗結束后,PCR反應管嚴禁打開,及時放置次氯酸鈉消毒液中浸泡。
5、做好日常消毒工作
每日工作完成后,及時處理實驗室內廢棄物,消毒液擦拭操作臺面和儀器,拖布蘸取消毒液擦拭地面,開窗同風10分鐘以上。