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  • 發布時間:2019-09-26 17:58 原文鏈接: 蛋白質定量檢測方法——考馬斯亮藍法

    考馬斯亮藍顯色法的基本原理是根據蛋白質可與考馬斯亮藍G-250 定量結合。當考馬斯亮藍 G-250 與蛋白質結合后,其對可見光的最大吸收峰從 465nm 變為 595nm。

    在考馬斯亮藍 G-250 過量且濃度恒定的情況下,當溶液中的蛋白質濃度不同時,就會有不同量的考馬斯亮藍 G-250 從吸收峰為 465nm 的形式轉變成吸收峰為 595nm 的形式,而且這種轉變有一定的數量關系。

    一般情況,當溶液中的蛋白質濃度增加時,顯色液在 595nm 處的吸光度基本能保持線性增加,因此可以用考馬斯亮藍 G-250 顯色法來測定溶液中蛋白質的含量。

    優點:靈敏度高,測定快速、簡便,干擾物質少,不受酚類、游離氨基酸和緩沖劑、絡合劑的影響,適合大量樣品的測定。

    缺點:由于各種蛋白質中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同,因此用于不同蛋白質測定時有較大的偏差。


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