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  • 發布時間:2019-10-19 11:09 原文鏈接: 脂類的測定方法(二)

    牛奶的平均成分:

    牛乳100%:水分87.5%,總固體12.2%,維生素,免疫體和酶;

    總固體12.2%:非脂固體8.8%,乳脂肪3.4%;

    非脂固體8.8%:蛋白質3.5%,乳糖4.6%,礦物質Ca.p.Fe.K等;

    蛋白質3.5%:酪蛋白3.0%,白蛋白0.4%,球蛋白0.1%。

    在成分表中乳脂肪3.4%是需要我們檢測。在牛乳中蛋白質比人乳蛋白質高。乳糖含量比人乳少,礦物質中Ca 的含量比人乳多,而Fe的含量比人乳少。

    牛乳中脂肪含量標準如下

    生鮮牛乳:

    (1)特級≥ 3.2%

    (2)一級≥ 3.0%

    (3)二級≥ 2.8%

    消毒牛乳≥ 3.0 %

    眾所周知牛乳是乳濁液。它的脂類在牛乳中并不是以溶解狀態存在,而是以脂肪球呈乳濁液狀態存在,在它周圍有一層膜,這層膜使脂肪球得以在乳中保持乳濁液的穩定狀態,這層膜其中含蛋白質。磷脂等許多物質,通常用濃H2SO4時非脂成分溶解,脂肪球膜就被軟化破壞,于是乳濁液就破壞,脂肪即可分離出來,這是公認的標準分析法。

    巴布科克法和蓋勃氏法這兩種方法是有兩個科學家研制出來,一個是美國的Babcock在1890年研究出測牛乳的脂肪,后來經過2年,即1892年由英國的蓋勃液研究出測牛乳的脂肪。

    這兩種方法都是用來提取乳制品中的脂肪,此法也叫濕法提取,因為樣品不需要事先烘干,脂肪在牛乳中以乳膠體形式存在,要測定脂肪必需要破壞乳膠體脂肪與其它非脂成分分離,分離出來的非脂成分一般用濃H2SO4分解,用容量法定量,操作簡便,為許多國家用于乳制品的常規分析。

    Babcock法 原理

    利用硫酸溶解乳中的乳糖浴蛋白質等非脂成分使脂肪球膜破壞,脂肪游離出來,在乳脂瓶中直接讀取脂肪層,從而迅速求出被檢乳中的脂肪率。

    2、方法

    準確吸取17.6ml牛乳 → 于乳脂瓶中 → 加17.5ml硫酸(用量筒量取)→ 混合 → 離心5分鐘(1000轉/分) →60℃水至瓶頸 → 離心2分鐘(1000轉/分) → 加60℃水至4%刻度線 →離心1分鐘 → 60℃水浴中 →使脂肪柱穩定 → 讀取

    加H2SO4的作用:

    (1)溶解蛋白質

    (2)乳解乳糖

    (3)減少脂肪的吸附力

    因為非脂成分溶解在H2SO4中,這樣就增加了消化液的比重(H2SO4比重1.820-1.825,脂肪比重小于1),即比重大于1.820-1.825,脂肪的比重小于1的,這樣就使得脂肪迅速而完全地與非脂沉淀,另外離心的作用是脂肪非常清晰的分離,加熱的目的,使脂肪吸附力降低,上浮速度加快,這就是采用Babcock法測牛乳脂肪。

    近來在有些科技書中,將Babcock法加以改進,用來測肉制品和谷物類樣品。

    因為Babcock法用濃硫酸作為蛋白質的溶解劑,對測肉制品會發生炭化,這些碳化物懸浮在脂肪層和水層的界面間,這樣造成了讀數不準確,因此,他們研究了各種代替硫酸的試劑,后來他們認為利用高氯酸-醋酸混合液代替硫酸,測定肉及肉制品的脂肪,測定值與AOAC法一致,精密度以標準偏差表示為0.2%。

    所用試劑:

    高氯酸-醋酸混合液

    6%的高氯酸與等容量的醋酸混合。

    具體方法:

    稱9克絞碎的肉 ,于巴氏瓶中 ,加混合酸30m ,于沸水浴中加熱15min(使樣品充分溶解), 在加混合酸 ,使之達到瓶子的刻度范圍

    離心2min (1000轉/分) 60℃水浴10min 讀取

    計算: Fat% = H x 0.95

    H—讀取脂肪柱的數值

    0.95—溶解于脂肪層中的醋酸修正值

    改良的巴布科克法:對溶質品質類經過加熱的試樣,水浴中加熱15min即可完全溶解,對于生肉試樣由于沒發生熱變性 ,采用混合酸后,肉蛋白質在一定時間內凝固,溶解的時間大約需要25分鐘。

    三、Gerber法(蓋勃氏法)

    這種方法對糖分高的樣品,如采用此方法容易焦化,致使結果誤差大,故不適宜。

    1、 原理:

    在牛乳中加硫酸,可破壞牛乳的膠質性,使牛乳中的酪蛋白鈣鹽變成可溶性的重硫酸酪蛋白化合物,并且能減小脂肪球的吸附力,同時還可增加消化液的比重使脂肪更容易浮出液面,在操作中還需要加入異戊醇,降低脂肪球的表面張力,促進脂肪球的離析,但是異戊醇的溶解度很小,所以在操作中,不能加的太多,如果加的太多,異戊醇會進入脂肪中,使脂肪體積增大,而且會有一部分異戊醇和硫酸作用生成硫酸脂,反應如下:

    2C5H11OH + H2SO4 → (C5H11O)2SO2 + 2H2O

    在操作過程中加熱65-70℃和離心處理,目的都使脂肪酸迅速而徹底分離。

    2、 方法

    取10ml H2SO4于乳脂瓶中--準確量取11.0ml牛乳--加1ml異戊醇 --混合--65℃水浴5min

    離心5min (1000轉/分) --65℃水浴5min---立即讀取

    說明:

    (1) 在巴氏法中采用17.6ml吸管,實際上注入巴氏瓶中只有17.5ml,牛乳的比重1.030g/ml,故樣品質量為

    17.5 x 1.030 = 18g

    巴氏瓶的刻度共10大格(0-10%),每大格容積為0.2ml,脂肪的平均比重為0.9,其脂肪質量為 0.2 x 10(10大格)x0.9 (脂肪比重)= 1.8(g),18g 樣品中含1.8g脂肪即瓶頸全部刻度表示的脂肪含量10%,每一大格代表1% 的脂肪,故巴氏瓶頸刻度讀數即直接為脂肪的百分含量。

    (2)硫酸濃度及用量要嚴格遵守方法中規定的要求,硫酸濃度過大會使牛乳炭化成黑色溶液而影響讀數;濃度過小則不能氏酪蛋白完全溶解,會使測定值偏低或使脂肪層渾濁。


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