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  • 發布時間:2019-10-27 12:24 原文鏈接: 細菌的運動性觀察

    (一)實驗原理

    細菌是否具有鞭毛是細菌分類鑒定的重要特征之一。采用鞭毛染色法雖能觀察到鞭毛的形態、著生位置和數目,但此法既費時又麻煩。如果僅須了解某菌是否有鞭毛,可采用懸滴法或水封片法(即壓滴法)直接在光學顯微鏡下檢查活細菌是否具有運動能力,以此來判斷細菌是否有鞭毛。此法較快速、簡便。

    懸滴法就是將菌液滴加在潔凈的蓋玻片中央,在其周邊涂上凡士林,然后將它倒蓋在有凹槽的載玻片中央,即可放置在普通光學顯微鏡下觀察。水封片法是將菌液滴在普通的載玻片上,然后蓋上蓋玻片,置顯微鏡下觀察。

    大多數球菌不生鞭毛,桿菌中有的有鞭毛有的無鞭毛,弧菌和螺菌幾乎都有鞭毛。有鞭毛的細菌在幼齡時具有較強的運動力,衰老的細胞鞭毛易脫落,故觀察時宜選用幼齡菌體。

    (二)實驗器材

    1. 活材料:培養12-16h小時的枯草桿菌(Bacillus subtilis)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、假單胞菌(Pseudomonas sp.)。

    2. 試劑:香柏油、二甲苯、凡士林等。

    3. 器材:凹載玻片、蓋玻片、鑷子、接種環、滴管、擦鏡紙、顯微鏡。

    (三)實驗方法:

    1. 制備菌液:在幼齡菌斜面上,滴加3-4mL無菌水,制成輕度混濁的菌懸液。

    2. 涂凡士林:取潔凈無油的蓋玻片1塊,在其四周涂少量的凡士林。

    3. 滴加菌液:加1滴菌液于蓋玻片的中央,并用記號筆在菌液的邊緣做一記號,以便在顯微鏡觀察時,易于尋找菌液的位置。

    4. 蓋凹玻片

    將凹玻片的凹槽對準蓋玻片中央的菌液,并輕輕地蓋在蓋玻片上,使兩者粘在一起,然后翻轉凹玻片,使菌液正好懸在凹槽的中央,再用鉛筆或火柴棒輕壓蓋玻片,使玻片四周邊緣閉合,以防菌液干燥

    若制水封片,在載玻片上滴加一滴菌液,蓋上蓋玻片后即可置顯微鏡下觀察。

    5. 鏡檢

    先用低倍鏡找到標記,再稍微移動凹玻片即可找到菌滴的邊緣,然后將菌液移到視野中央換高倍鏡觀察。由于菌體是透明的,鏡檢時可適當縮小光圈或降低聚光器以增大反差,便于觀察。鏡檢時要仔細辨別是細菌的運動還是分子運動(即布朗運動),前者在視野下可見細菌自一處游動至他處,而后者僅在原處左右擺動。細菌的運動速度依菌種不同而異,應仔細觀察。

    結果:有鞭毛的枯草桿菌和假單胞菌可看到活躍的運動,而無鞭毛的金黃色葡萄球菌不運動。

    (四)注意事項

    1. 檢查細菌運動的載玻片和蓋玻片都要潔凈無油,否則將影響細菌的運動。

    2. 制水封片時菌液不可加得太多,過多的菌液會在蓋玻片下流動,因而在視野內只見大量的細菌朝一個方向運動,從而影響了對細菌正常運動的觀察。

    3. 若使用油鏡觀察,應在蓋玻片上加香柏油一滴。


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