植物組織中纖維素含量的測定

纖維素是植物  細胞壁的主要成分之一，纖維素含量的多少，關系到植物細胞機械組織發達與否。因而影響作物的抗倒伏，抗病蟲害能力的強弱。測定糧食、蔬菜及纖維作物產品中纖維素含量是鑒定其品質好壞的重要指標。

一、原理
纖維素（Cell  ulose）為β－葡萄糖殘基組成的多糖，在酸性條件下加熱能分解成β－葡萄糖。β－葡萄糖在強酸作用下，可脫水生成β－糠醛類化合物。β－糠醛類化合物與蒽酮脫水縮合，生成黃色的糠醛衍生物。顏色的深淺可間接定量測定纖維素含量。

二．材料、儀器設備  及試劑
（一）材料：烘干的米、面粉或風干的棉、麻纖維。
（二）儀器設備：1. 小試管；2. 量筒；3. 燒杯；4. 移液管；5. 容量瓶；6. 布氏漏斗；7. 分析天平；8. 水浴鍋；9. 電爐；10. 分光光度計。
（三）試劑：1. 60％H2SO4溶液；2. 濃H2SO4（AR）；3. 2％蒽酮試劑：將2g蒽酮溶解于100ml乙酸乙酯中，貯放于棕色試劑瓶中；4. 纖維素標準液：準確稱取100mg純纖維素，放入100ml量瓶中，將量瓶放入冰浴中，然后加冷的60％H2SO460～70ml，在冷的條件下消化處理20～30min；然后用60％H2SO4稀釋至刻度，搖勻。吸取此液5.0ml放入另一50ml量瓶中，將量瓶放入冰浴中，加蒸餾水稀釋至刻度，則每ml含100μg纖維素。

三.實驗步驟
（一）求測纖維素標準回歸方程
1. 6支小試管，分別放入0，0.40，0.80，1.20，1.60，2.00ml纖維素標準液，然后分別加入2.00，1.60，1.20，0.80，0.40，0ml蒸餾水，搖勻，則每管依次含纖維素0，40，80，120，160，200μg。
2. 向每管加0.5ml2％蒽酮，再沿管壁加5.0ml濃H2SO4，塞上塞子、搖勻，靜置1min。然后在620nm下，求測不同含量纖維素溶液的吸光度。
3. 以測得的吸光度為Y值，對應的纖維素含量為X值，求得Y隨X而變的回歸方程。
（二）樣品纖維素含量的測定
1. 稱取風干的棉花纖維0.2g于燒杯中，將燒杯置冷水浴中，加入60％H2SO460ml，并消化30min，然后將消化好的纖維素溶液轉入100ml容量瓶，并用60％H2SO4定容至刻度，搖勻后用布氏漏斗過濾于另一燒杯中。
2. 取上述濾液5ml放入100ml容量瓶中，在冷水浴上加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻后用。
3. 取2中的溶液2ml于具塞試管中，加入0.5ml 2％蒽酮試劑，并沿管壁加5ml濃H2SO4，塞上塞子，搖勻，靜置12min，然后在620nm波長下，求測吸光度。

四、結果與分析
根據測得的吸光度按回歸方程求出纖維素的量，然后按下式計算樣品纖維素的含量：
Y(%)＝X×10-6×a×100 /W
式中：X－按回歸方程計算出纖維素含量（μg）。W－樣品重（g）。10-6－將μg換算成g的系數。A－樣品稀釋倍數。Y－樣品中纖維素含量（％）。