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  • 發布時間:2019-11-12 16:23 原文鏈接: 用Hoechst33258測定DNA實驗

    實驗方法原理在緩沖液中勻漿細胞或組織,繼用超聲處理。以一定量的細胞懸液與Hoechst33258混勻,測定其熒光。
    實驗步驟材料

    非無菌:

    緩沖液:0.05mol/LNaPO4;2.0mol/L NaCl,pH7.4 , 含 2 X l0-3 mol/L EDTA 。
    Hoechst33258;緩沖液中,100ng/ml 以上的 DNA 用 lug/ml,10~100ng/ml 則用 0.lug/ml。

    操作步驟

    1. 在緩沖液中用 Potter 勻漿器勻漿細胞,1X 105 個細胞/ml , 1min。

    2. 超聲處理 30s。

    3. 用 Hoechst 33258 和緩沖液按 1 : 10 稀釋細胞。

    4. 在 492nm,激發為 356nm 處檢測熒光輻射,以小牛胸腺 DNA 作為標準。


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