電泳儀基本類型

電泳儀有紙電泳儀、醋酸纖維素薄膜電泳儀、薄層電泳儀、凝膠電泳儀、等電聚焦電泳儀、等速電泳儀、免疫電泳儀、電泳轉移儀、雙向電泳儀和毛細管電泳儀等類型。

一、紙電泳儀：

1、方法：

以濾紙作為支持載體，水平架在兩個裝有緩沖液的容器間，樣品點于濾紙中央。當濾紙被緩沖液潤濕后蓋上絕緣密封罩，即可輸入直流電進行電泳。

2、特點：

（1）電壓越高，帶電粒子的遷移速度越快，分離時間越短。

（2）裝置簡單，分辨率低。

二、醋酸纖維素薄膜電泳儀：

1、方法：

以醋酸纖維素薄膜作為支持載體，電泳結束經染料染色后，用適當試劑使膜透明，然后用光密度儀掃描測定。

2、特點：

（1）分離速度快。

（2）醋酸纖維素薄膜經過冰醋酸乙醇溶液或其它透明液處理后可透明，有利于對電泳圖的光吸收掃描測定和膜的長期保存。

三、薄層電泳儀：

1、方法：

將載體與緩沖液調制成適當厚度的薄層進行電泳。

2、常用支持物：

有淀粉、瓊脂、纖維素粉和硅膠等。

四、凝膠電泳儀：

凝膠電泳是以凝膠作為支持載體的電泳技術。

1、聚丙烯酰胺凝膠電泳儀：

可將血清蛋白分離出20多個區帶。

廣泛用于分離某些蛋白質和較小分子的核酸。

2、瓊脂糖凝膠電泳儀：

（1）區帶易染色，干燥后背景幾乎無色，便于光密度掃描檢測。

（2）電泳速度快，血清樣品無需處理即可直接加樣進行檢測。

（3）可用于分離血清蛋白、血紅蛋白和脂蛋白等。

3、淀粉凝膠電泳儀：

（1）方法：

淀粉凝膠電泳儀是以淀粉凝膠作為載體的電泳技術。凝膠鋪厚些，可一層一層的剝層分析（一板多測），可用于同工酶分析。已很少使用。

（2）特點：

1）天然淀粉經加工處理即可使用，但凝膠孔徑可調性差。

2）不同批次淀粉凝膠之間的質量相差很大，很難得到重復的電泳結果。

3）電泳時間長，操作麻煩，分辨率低。

五、等電聚焦電泳儀：

1、蛋白質的等電點pI：

兩性蛋白質分子的表面帶有COOˉ羧基和NH₃⁺氨基，當溶液酸堿度在某一pH值時，分子所帶正、負電荷相同（即凈電荷為零），這時蛋白質分子在電場中不會移動，此pH值稱為該蛋白質的等電點pI。

（1）當pH＜pI時，溶液相對于等電點呈酸性，蛋白質帶正電，在電場中向負極移動。

（2）當pH＞pI時，溶液相對于等電點呈堿性，蛋白質帶負電，在電場中向正極移動。

2、等電聚焦概念：

設溶液的pH值是位置的函數，樣品在一個線性pH梯度的溶液中電泳時，每種被分離的兩性物質在移向與其等電點一致的pH位置后不再移動，稱為聚焦。因這點凈電荷正負抵消為零，故又稱等電聚焦。

3、特點：

（1）區帶狹窄，很小樣品也能獲得清晰的區帶界面。

（2）分辨率高。

（3）電泳速度快。

（4）適用于分離中、大分子量生物組分，如蛋白質。

六、等速電泳儀：

1、方法：

等速電泳是基于有效離子淌度的差異進行帶電離子的分離，屬于不連續介質電泳，需要兩種緩沖液。

前導電解液：含有與溶質離子電荷相同且淌度為體系中高的離子。

尾隨電解液：體系中淌度低的離子。

樣品離子的淌度介于這兩者之間。

2、特點：

（1）所有區帶以同一速度移動。

（2）區帶銳化，界面清晰，分離能力強。

（3）區帶濃縮，即各區帶中離子的濃度為定值。

七、免疫電泳儀：

1、方法：

免疫電泳是將電泳和免疫反應相結合，先利用電泳將蛋白質組分分離，再分別與抗體反應進行檢測分析。

電泳中，樣品中的抗原通過含有相應抗體的pH = 8.6的瓊脂糖凝膠薄層，抗原在pH = 8.6時通常帶強負電，而抗體在此pH不帶電而不能遷移。抗原在含有抗體的凝膠中電泳時發生免疫反應。初抗原過量，僅產生可溶性的免疫混合物，與抗原一起向陽極移動。當抗體與抗原比例合適時，形成大的不溶性的免疫沉淀。

2、類型：

（1）擴散免疫電泳：用于純化抗原、抗體成分分析和體液蛋白質識別分析等。

（2）對流免疫電泳：常用于以已知抗體檢測相應的抗原。

（3）火箭免疫電泳：抗體量不變時，火箭峰的高度與抗原量成正比。

（4）固定免疫電泳：常用于M蛋白質的分型鑒定。

八、電泳轉移儀：

1、方法：

電泳轉移儀又稱電泳印跡儀，是利用低電壓、大電流的直流電場使凝膠電泳的分離區帶或電泳斑點轉移到特定的膜上，如硝化纖維素膜、PVDF膜、陽離子尼龍膜和重氮化紙等。

蛋白質印跡將高分辨率的電泳技術與靈敏、專一的免疫探測技術結合起來，用針對蛋白特定氨基酸序列的特異性試劑作為探針進行檢測。對于蛋白質，通常使用的探針是抗體，它與附著于固定基質上的靶蛋白發生特異性反應。

2、特點：

電泳印跡相當于將一次電泳的結果復制成幾份，再進行蛋白質、同工酶的放射自顯影和免疫檢測等，大大提高了效率，是當前分子生物學研究的熱門技術。

九、雙向電泳儀：

1、方法：

向根據蛋白質的等電點不同在pH梯度凝膠中進行等點聚焦。

第二向根據蛋白質的分子量大小不同在垂直或水平方向進行SDS－PAGE電泳。

2、特點：

（1）可多次獲得相同的印跡復本，做多次分析鑒定。

（2）靈敏性高，試劑用量少，速度快，操作簡便。

十、毛細管電泳儀：

毛細管電泳是以毛細管為分離通道，以高壓直流電場為驅動力，利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離，是分析科學繼液相色譜之后的又一重大進展，使分析科學從微升級進入到了納升級水平，不僅使單細胞乃至單分子分析成為可能，也使蛋白質和核酸等生物大分子分析有了新的轉機。