一、移液器的工作原理
移液器的工作原理是活塞通過彈簧的伸縮運動來實現吸液和放液。 在活塞推動下,排出部分空氣, 利用大氣壓吸入液體, 再由活塞推動空氣排出液體。 使用移液器時,配合彈簧的伸縮性特點來操作,可以很好地控制移液的速度和力度。
二、移液器的操作使用
1. 移液器規范操作步驟
(1)第一步 設定移液體積
從大體積調節至小體積時,為正常調節方法,逆時針旋轉刻度即可,從小體積調節至大體積時,可先順時針調至超過設定體積的刻度,再回調至設定體積,可保證最佳的精確度。
(2)第二步 裝配移液器吸頭
將移液器端垂直插入吸頭,左右微微轉動,上緊即可;
特別提示:用移液器反復撞擊吸頭來上緊的方法是非常不可取的,長期這樣操作,會導致移液器中的零部件因強烈撞擊而松散,甚至會導致調節刻度的旋鈕卡住。
(3)第三步 吸液和放液
吸液
↓
吸頭尖端需浸入液面3 mm 以下
↓
慢吸慢放,控制好彈簧的伸縮速度
↓
放液時吸頭尖端靠在容器內壁
2. 移液小技巧
● 預潤濕吸液
粘稠液體可以通過吸頭預潤濕的方式來達到精確移液,先吸入樣液,打出, 吸頭內壁會吸附一層液體,使表面吸附達到飽和,然后再吸入樣液,最后打 出液體的體積會很精確。
● 正向吸液與反向吸液
正向吸液是指正常的吸液方式 ,操作時吸液可將按鈕按到第一檔 吸液,釋放按鈕。放液時先按下第一檔,打出大部分液體,再按下第二檔, 將余液排出。
反向吸液是指吸液時將按鈕直接按到第二檔再釋放,這樣會多吸入一些液體,打出液體時只要按到第一檔即可。多吸入的液體可以補償吸頭內部的表面吸附,反向吸液一般與預潤濕吸液方式結合使用,適用于粘稠液體和易揮發液體。
3. 錯誤的操作方式
錯誤: 裝配吸頭時用移液器反復撞擊吸頭,以上緊
正確: 插入吸頭,左右輕轉旋轉上緊吸頭
錯誤: 吸頭與移液器不匹配, 影響氣密性
正確: 選用與移液器匹配的,有質量保證的吸頭
錯誤: 吸液時,移液器傾斜吸液
正確: 垂直吸液
錯誤: 吸頭內含有未打出的液體時,移液器平置于桌面
正確: 將移液器垂直掛在移液器支架上
錯誤: 用大量程的移液器移取小體積的液體
正確: 移液體積需保證在移液器所提供的量程范圍之內才符合不準確度和不精確度的要求
錯誤: 吸取具有強揮發性的液體
正確: 如果一定要移取強揮發性的液體,應該在移液結束后立刻拆開移液器,讓蒸汽揮發,同時,建議使用外置活塞式移液器。
錯誤: 吸液速度和放液速度過快
正確: 慢吸慢放
三、實驗室內移液器的自行快速檢測
移液器在使用過程中,如果懷疑其精確度,可根據以下提示自行檢測:
懷疑一:移液器是否有漏氣?
1. 自行檢測:
目視法檢測:將吸取液體后的移液器垂直靜置15秒,觀察是否有液滴緩慢的流出。若有流出,說明有漏氣現象。
壓力泵檢測:使用專用的壓力泵,檢測壓力情況,判斷是否漏氣。
2. 可能的原因:
- 吸頭是否匹配?
—— 使用原裝匹配的吸頭
- 裝配吸頭時有無上緊?
- 移液器內部氣密性不好?
—— 與Eppendorf公司維修工程師聯系
懷疑二:液體、移液器、吸頭以及環境的溫度差異是否會影響移液器的準確度?移取液體的溫度與吸頭和移液器的溫度不一致的情況下,液體溫度高于吸頭的,移取的液體體積會偏大,液體溫度低于吸頭的,移取的液體體積會偏小。
懷疑三:液體樣品的密度和水是否有非常明顯的區別?
Eppendorf 移液器出廠前的校準是用水作為標準液進行測試的,如果所操作的液體與水的比重有很大差異,所給出的不精確度和不準確度就不能滿足,從而產生誤差。
懷疑四:吸液速度太快,是否會導致移液體積不準確?
吸液速度太快會產生反沖和氣泡,導致移液體積不準確。
ps:移液器長時間不用時建議將刻度調至最大量程,讓彈簧恢復原形,延長移液器的使用壽命。
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