在2004年度北京市臨床微生物室間質控活動中,我們發放了一株產超廣譜β內酰胺酶的大腸埃希菌,要求做抗菌素阿莫西林/克拉維酸的敏感性試驗。132個參加室間質控單位中的45個單位(大部分為三級甲等醫院)做了阿莫西林/克拉維酸對大腸埃希菌的最小抑菌濃度(MIC)測定;45家單位中主要以3種不同的方法進行了MIC測定,這三種方法是國產96孔微量稀釋板、V1TEK-AMS(包括VITEK32、VITEK60、V1TEK TWO)和MicroScan40。其各自的試驗結果見下表。
3種不同試驗方法測得的阿莫西林/克拉維酸對大腸埃希菌的MIC結果
阿莫西林/克拉維酸判斷折點 | 試驗結果 | 稀釋法MIC(μg/ml) | ||
微量稀釋板 | VITEK-AMS | MicroScan40 | ||
MIC≥32/16(R) | ≥64/32 | 7 | 3 | 1 |
MIC≤8/4(S) | 8/4 | 5 | 17 | 4 |
正確百分率 | 40% | 83.3% | 66.7% |
從上表中可見VITEK-AMS、MicroScan40、微量稀釋板三種不同方法阿莫西林/克拉維酸對大腸埃希菌的正確百分率分別為83.3%、66.7%、40%。由于只有6家單位使用MicroScan40進行了測定,所以其結果難以最終評定。
我們使用大腸埃希菌ATTCC35218對微量稀釋板法和VITEK-AMS進行了質控,阿莫西林/克拉維酸的MIC值分別為32/16和≤8/4,重復試驗后得到相同的結果。美國臨床實驗室標準委員會(NCCLS)明確指出氨芐西林、甲氧西林、亞胺培南、克拉維酸是特別不穩定的藥物,較長時間保存和保存溫度不當很容易導致這些藥物的失活或者效價降低,實驗室應嚴格按照要求條件進行保存。
微量稀釋板法所測得的值超過質控范圍和實驗結果的正確率只有40%,這可能與該板中藥物是液體制劑,不容易保存和運輸有密切關系。如果保存時間過長、反復凍融都有可能導致酶抑制劑克拉維酸效價降低,近而導致實驗結果的不準確。VITEK-AMS所用的GNS卡片中的阿莫西林/克拉維酸是干粉制劑,便于保存,不易失效。本次試驗中阿莫西林/克拉維酸藥敏試驗的正確率為83.3%。
目前大多數實驗室只用大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923、銅綠假單胞菌ATCC27853、糞腸球菌ATCC29212對日常藥敏試驗進行質量控制,但是在細菌實驗室中想要準確測定阿莫西林/克拉維酸對相關細菌的藥敏試驗結果,應嚴格按照NCCLS的規定用大腸埃希菌ATCC35218對β—內酰胺/β—內酰胺酶抑制劑復合物進行質量控制控。NCCLS 2004版M100—S14中規定大腸埃希菌ATCC35218對阿莫西林/克拉維酸的質控范圍:紙片擴散法為17-22mm,稀釋法為4/2-16/8μg/ml。