光學顯微鏡的正確使用

光學顯微鏡的正確使用和維護

光學顯微鏡的結構、使用和維護 顯微鏡是組織胚胎學實習課的重要學習工具，每個醫學生都必須熟悉它的主要結構和功能，使用時必須愛護，按正規的操作熟練地正確使用顯微鏡，以免損壞，保證實驗課的順利進行。 

Ⅰ．顯微鏡的基本結構 各種類型的顯微鏡，其基本結構大致相似，可分為機械部分和光學部分。 機械部分 1、鏡座、鏡柱、鏡臂，構成顯微鏡的支架。 2、鏡筒：位于鏡臂上方，上端裝有目鏡，下端連接物鏡轉換器。 3、物鏡轉換器：裝在鏡臂的末端，鏡筒的下方，呈盤狀，下面有3—4個物鏡孔，可安裝不同放大倍數的物鏡。換用物鏡時，可轉動旋轉盤。 4、載物臺（鏡臺）：位于鏡柱后方的方形平臺，用于放置玻片標本。臺中央有一通光孔，兩側有用以固定玻片標本的壓片夾。載物臺上裝有切片推進器，可前后左右移動標本。 5、調焦手輪：能調節焦距，位于鏡柱下方兩側，有粗調焦手輪（粗調）和細調焦手輪（細調）。粗調焦手輪可使載物臺作較大距離和較快速度地升降，適合低倍鏡對焦；細調焦手輪可使載物臺緩慢升降，用作較精細的調節，適合高倍鏡和油鏡對焦。

Ⅱ.光學部分 1目鏡：位于鏡筒上端，刻有10×符號，表示其放大倍數。目鏡鏡筒內有一指針，用以指明視野中觀察物像的部位，以利示范和提問。在目鏡的下方有屈光度調節環，可通過調節屈光度來補償左右眼的視力差。 2物鏡：裝在物鏡轉換器上，依放大倍數不同分為：放大鏡，上面刻有4×，放大倍數為4倍；低倍鏡，上面刻有10×，放大倍數為10倍；高倍鏡，上面刻有40×，放大倍數為40倍；油鏡，上面刻有100×，放大倍數為100倍。顯微鏡的總放大倍數等于目鏡和物鏡放大倍數的乘積。如：目鏡頭10×、物鏡100×，其放大倍數為10×100 =1000倍 3聚光器：位于載物臺通光孔下方，可使進入的光線集中于標本上，其一側有聚光器垂直運動手柄，利用手柄可調節聚光器的垂直位置，上升時光線增強，下降時光線減弱。 4光闌：位于聚光器下方，撥動其上的聚光器孔徑光闌調節桿，可使光圈擴大和縮小，以調節進光量。使用時將調節桿撥至與光路中的物鏡倍率相同的數字。 本實驗室顯微鏡為尼康YS100型，雙目鏡，電光源照明。在鏡柱右側有電源開關，當開關轉向I時，燈亮，轉向0時，燈滅。在電源開關下方有亮度調節鈕，順時針旋轉時，視場變亮，逆時針旋轉時，視場變暗。

Ⅲ。顯微鏡的使用方法 使用時雙手握住鏡臂，輕放在自己座位左前方的實驗臺上，以離實驗臺邊緣10厘米左右處為宜

（一）低倍鏡的使用方法

1． 對光：首先打開電源開關，旋轉亮度調節鈕，燈泡發亮；轉動粗調焦手輪，使載物臺略升高；旋轉物鏡轉換器，使低倍鏡對準通光孔（可聽見輕微的碰撞聲）；打開光闌，將聚光器調至上端極限處，再稍下降；雙眼對準目鏡觀察，再旋轉亮度調節鈕，直到視野內光線明亮均勻為止；調節兩目鏡間距，使左右眼視野重疊合一。

2．放片：取一張玻片標本，注意標本的位置和正反面，將有蓋玻片的一面朝上，用片夾固定，然后轉動推片器旋鈕，將標本對準通光孔的中央。

3．調焦： 側視低倍鏡，旋轉粗調焦手輪，將載物臺提升至最高點。目鏡觀察，慢慢旋轉粗調焦手輪，降低載物臺，當視野中出現物像時，再用細調焦手輪調節，直到視野中物像清晰為止。 當左右眼存在視力差時，可通過調節屈光度來補償，調節方法是左眼通過左目鏡，轉動左目鏡上的屈光度調節環，對標本對焦；右眼通過右目鏡，轉動右目鏡上的屈光度調節環，對標本對焦。

（二）高倍鏡使用方法

1． 首先在低倍鏡下找到物像，將需要放大觀察的部分移至視野正中央，并調節清晰。

2． 側視物鏡，轉換高倍鏡。

3． 目鏡觀察，并慢慢轉動細調焦手輪，即可見到清晰的物像。

 （三）油鏡的使用方法

1． 一定要在高倍鏡下將擬用油鏡觀察的結構移到視野正中央，并調節清晰。

2． 開大光闌，旋轉物鏡轉換器，將高倍鏡移出光路。眼睛注視側面，在欲觀察標本的部位滴上一滴香柏油，慢慢將油鏡移入光路，使油鏡面與油滴接觸。

3． 從目鏡觀察，同時慢慢上下轉動細調焦手輪，直至出現清晰的物像。油鏡使用完畢后，必須用擦鏡紙蘸少許二甲苯將標本、油鏡頭和其它可能有油跡的部分擦凈（反復多擦幾次）。

切片的觀察，應按肉眼——低倍——高倍——油鏡（必要時）

① 肉眼：了解標本的大小、形狀、著色（染色方法）和肉眼可見的特殊標志等。

② 低倍：是識別組織和器官的組織結構及其特點的重要方法，低倍視野大，移動迅速，便于了解標本全貌。

③ 高倍和油鏡：主要了解細胞水平的細微結構，應先經低倍選好目標后再用高倍鏡和油鏡觀察。

Ⅳ。顯微鏡使用的注意事項 1．必須正確地移動和放置顯微鏡。 2．使用前要檢查，如發現缺損或使用時損壞，應立即報告指導老師。 3．放置玻片標本時，應將有蓋玻片的一面向上，否則使用高倍鏡和油鏡時將找不到物像，同時又容易損壞標本和鏡頭。 4．使用高倍鏡和油鏡時，只能旋轉細調焦手輪，不能使用粗調焦手輪。 5．油鏡使用后，務必將浸油擦凈。鏡頭只能用擦鏡紙擦拭。嚴禁用手指、手帕或手紙，以免磨損鏡面。 6．不能在高倍鏡和油鏡下更換切片標本。 7．不得隨意取出目鏡或拆卸零部件，以防灰塵落入或丟失、損壞等。 8．顯微鏡使用完畢后，先將亮度調節鈕調到最低，然后關閉顯微鏡電源。待冷卻后，罩好顯微鏡防塵罩，并作好顯微鏡使用記錄。