本文對高效液相色譜法測定飼料中三聚氰胺的色譜分離條件進行了優化方法線性好，回收率高，精密度好。飼料中的雜質峰對三聚氰胺峰的干擾較小。該方法簡便易行，準確度和精密度均符合要求。可用于復合飼料中三聚氰胺的檢測。
1、儀器
高效液相色譜紫外檢測器和色譜工作站
氮吹儀;
振蕩器、 旋渦振蕩器及均質器;
電子分析天平的靈敏度為0.0001g。
冷凍離心機;
0.45μm 針筒式微孔濾膜過濾器,
超聲波清洗器,
混合陽離子交換柱，60mg/3mL固相萃取儀pH 計。
2、試劑
三聚氰胺對照品 ：含量為 99.0％）,
乙腈、甲醇與庚烷磺酸鈉為色譜純,
氨、乙酸醋酸鉛均為分析純實驗用水為超純水。
3、溶液配制
1%冰醋酸溶液：取5 ml冰醋酸裝在500 ml容量瓶中，用水稀釋，固定在水垢上5%氨水甲醇溶液：取5ml氨水于100ml容量瓶中加甲醇定容至刻度。將醋酸鉛溶液22g/L：11g醋酸鉛溶于300ml水中，定容至500ml。20%甲醇溶液：取甲醇200ml，加水800ml，混勻，流動相：2.0 2g庚磺酸鈉，取1L瓶，溶于水，稀釋成規模化。pH值調整為用醋酸。溶液為850ml，加入150ml乙腈。將溶液混合、過濾并脫氣。
三聚氰胺標準儲備液：在50 ml藥瓶中準確提取三聚氰胺對比劑0.0505g，超聲波溶解于甲醇溶液中，固定體積，即1000μ/mL三聚氰胺標準儲備液。
三聚氰胺標準工作液：取適量三聚氰胺標準儲備液，用甲醇溶液稀釋成5個標準系列，濃度分別為1.0ug/ml、5.0ug/ml、10.0ug/ml、25.0ug/ml、50.0ug/ml。
4、色譜條件
色譜柱：C8 柱 （ 4.6mm×250mm , 5μm ） ;
流速 1.0 mL/min ;
進樣量: 20μL ;
柱溫: 30℃ ;
檢測波長：240nm。
5、試驗方法
樣品處理方法：進樣用均質機粉碎，稱取5.0g樣品（精確至0.01g）于150ml塞住的錐形瓶中，精密加入50ml 1%醋酸溶液，加入2.0ml醋酸鉛溶液，搖勻，超聲提取20分鐘。在靜置2min時，上液在50ml塞離心管中約30ml，離心5min10000r/min。
用3ml甲醇和3ml水預先活化steta-x-c柱。固相萃取柱用3ml水和3ml甲醇洗滌。萃取后上清液用3ml氨水甲醇溶液洗滌，50℃氮氣干燥，準確加入2.0ml甲醇溶液，旋轉1分鐘，通過0.45um濾膜，用高效液相色譜法測定。