液相色譜儀操作過濾的要點

任何進入高效液相色譜系統的顆粒物質都將被色譜柱入口端的篩板堵塞。隨后的結果是堵塞色譜柱，其特征是系統壓力增加和色譜峰失真，因此應采取各種預防措施，包括商業儀器本身的操作步驟和各種過濾設計以防止或減少顆粒物質進入HPLC系統從而延長儀器和柱的使用壽命，提高數據的可靠性在高效液相色譜系統中，顆粒物有三個主要來源:流動相、待測樣品和儀器系統部件的磨損

被測樣品

是被測樣品  一些實驗室在將所有樣品放入自動進樣器托盤（或手動進樣）之前，先通過0.45米的注射器過濾器進行過濾  這是從測試樣品中去除顆粒物的有效方法。  然而，在這個過程中還有一點需要關注:如果使用注射器過濾器，就不可能獲得100個通過過濾器的樣本，并且總會有或多或少的損失。  損失來自以下幾個方面:過濾膜的吸附、過濾器過濾的顆粒的吸附、注射器過濾膜過濾器與注射器連接處的泄漏等。  如果有損失，被測物質在過濾液體中的含量或濃度是否與原始基本樣品液體相同？這個話題通常需要實驗來證實確認此步驟是為了增加工作量和使用量,使用過濾器是一種消耗.每臺過濾器的價格從幾元到十幾元不等然而,在食品殘留分析中,由于基質的復雜性,過濾已成為必不可少的步驟,在實際分析工作中，每組樣品通常都要用外部標準品、添加的回收率或質量控制樣品進行測試。因此，只要在測試期間獲得的信噪比能夠滿足檢測極限要求，該步驟就可以被視為系統誤差并被忽略。

流動相

如果所有流動相都由高效液相色譜溶劑組成，則無需過濾流動相  這是因為有機溶劑的高效液相色譜等級，如乙腈，甲醇等。，在制造過程中通過0.2m微孔濾膜過濾。  同樣，無論你是購買高效液相色譜級水還是實驗室用超純水凈化系統制備的水，后一步也是通過0.2m微孔濾膜  然而，如果將固體物質如磷酸鹽添加到任何緩沖液中，流動相的過濾將是必要的步驟。  盡管緩沖鹽可以是可溶性的和高純度的，但它仍然可能含有顆粒物質。例如，當覆蓋試劑瓶的塑料內蓋時，當塑料瓶蓋壓在瓶口邊緣時會產生塑料顆粒  在這種情況下，添加的固體可以完全溶解，但是少量雜質顆粒作為殘留物存在于活性相中。

通過0.45米微孔濾膜過濾流動相是去除流動相中所有顆粒的有效方法  也可以使用0.2m微孔濾膜，但對于這種應用它們并不比0.45m微孔濾膜更有效，其過濾速度會更慢，特別是當實驗室使用的試劑和水的質量不是很好時。  建議實驗室在制備其標準操作程序時應規定，它們可以借鑒世界上類似實驗室的法規，即

當僅使用高效液相色譜級液體制備流動相時，不需要過濾，而所有流動相組分在使用前必須過濾。

在連接儲液器和泵的輸液管末端采用水槽過濾器(兩種普通材料是熔融玻璃砂芯過濾板和微孔金屬)也是重要的。  該過濾器的規格為10m微孔材料，因此不能代替移動相過濾步驟，但可以從系統中去除灰塵，并確保儲液瓶和輸液管使用的可靠性。

儀表系統部件

磨損后高效液相色譜系統中微粒物質的另一個主要來源是泵墊圈和噴油閥旋轉軸的磨損,對于輸液泵墊片的磨損和更換,有兩種不同的建議。

各種建議認為，一般實驗室輸液泵墊片的使用壽命通常為六個月至一年，因此建議更換這些墊片半年或一年，實驗室應根據上述觀點制定定期預防性維護計劃。  該觀點認為，由于輸液泵密封墊中的顆粒堵塞了色譜柱，因此更換密封墊比更換新色譜柱更便宜。  一些輸液泵具有玻璃砂芯或濾網，可以過濾掉流動路徑中泵墊圈上磨損的顆粒，以防止這些顆粒隨流動相一起流向柱頭。  如果有這樣的裝置，請參考輸液泵的操作手冊，并檢查清潔或更換過濾器的推薦間隔。

另一種建議是原墊片密封效果好，更換后易發生流動相泄漏因此只要沒有泄漏，就不應該輕易更換墊圈。

這兩種說法都有其理由建議與儀表公司工程師溝通如何操作。每個公司的工具仍然有些不同。

自動收集器旋轉軸的密封會隨著時間的推移而磨損但根據我的經驗，即使是高負荷的旋轉軸密封也可以使用幾年,如果您的自動進樣器系統具有計算進樣閥旋轉時間的功能，您可以設置一個報警鈴，提醒您何時達到預設的閥旋轉時間  有句話說，注射器又旋轉了20，000次，只有10，000次注射。然而，這似乎不是實驗室中涉及的正常樣品分析使用壽命，它們的實際使用壽命會更長。  旋轉軸密封磨損后，液體會滲出。顯而易見的特點是，同一樣品多次進樣后，峰面積值的差異相對較大。5）  當然，輸液泵密封墊和旋轉軸密封墊的磨損會在運動階段增加更多的磨損，加速對這些部件的損壞  此外，如果日常工作的活躍階段有緩沖鹽，如磷酸鹽緩沖鹽，墊圈會磨損得更快。

無論顆粒物的來源是什么，都應該在實驗過程中去除建議在高效液相色譜（HPC）系統中使用0.45或0.5m在線多孔過濾器該系統連接自動采樣器和色譜柱，即使使用了保護柱。  該在線過濾器將成為一個帶擋板的過濾板，而不是柱頭，如果采用玻璃砂芯過濾板，更換起來既便宜又方便（幾分鐘內即可更換）  如果采用在線過濾，高效液相色譜系統會在檢測到每批樣品前記錄壓力值。當壓力上升到一定值時，如25或500psi，應更換玻璃砂芯過濾板。更換后，沖洗幾分鐘后，系統將恢復到原始壓力值。