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  • 發布時間:2020-02-22 23:14 原文鏈接: 常用酸、堿、鹽溶液配制方法大全(三)

       21.酚/氯仿溶液

      【配制方法】把酚和氯仿等體積混合后用0.1mol/L Tris?HCl(pH7.6)抽提幾次以平衡這一混合物,置棕色玻璃瓶中,上面覆蓋等體積的0.01mol/l Tris?HCl(pH7.6)液層,保存于4℃。

      【注意】酚腐蝕性很強,并可引起嚴重灼傷,操作時應戴手套及防護鏡,穿防護服。所有操作均應在化學通風櫥中進行。與酚接觸過的部位皮膚應用大量的水清洗,并用肥皂和水洗滌,忌用乙醇。

      22.10mmol/L苯甲基磺酰氟(PMSF)溶液

      【配制方法】用異丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml(10mmol/L),分裝成小份貯存于-20℃。如有必要可配成濃度高達17.4mg/ml的貯存液(100mmol/L)。

      【注意】PMSF嚴重損害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進或通過皮膚吸收后有致命危險。一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF,應立即用大量水沖洗之。凡被PMSF污染的衣物應予丟棄。PMSF在水溶液中不穩定。應在使用前從貯存液中現用現加于裂解緩沖液中。PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值為8.0時,20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min,這表明將PMSF溶液調節 為堿性(pH>8.6)并在室溫放置數小時后,可安全地予以丟棄。

      23.磷酸鹽緩沖溶液(PBS)溶液

      【配制方法】在800ml蒸餾水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCl調節 溶液的pH值至7.4加水定容至1L,在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌20min。保存于室溫。

      24.1mol/L乙酸鉀(pH7.5)溶液

      【配制方法】將9.82g乙酸鉀溶解于90ml純水中,用2mol/L乙酸調節 pH值至7.5后加入純水定容到1L,保存于-20℃。

      25.乙酸鉀溶液(用于堿裂解)

      【配制方法】在60ml 5mol/L乙酸鉀溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml水,即成鉀濃度為3mol/L而乙酸根濃度為5mol/L的溶液。

      26.3mol/L乙酸鈉(pH5.2和pH7.0)溶液

      【配制方法】在80ml水中溶解408.1g三水乙酸鈉,用冰乙酸調節 pH值至5.2或用稀乙酸調節 pH值至7.0,加水定容到1L,分裝后高壓滅菌。

      27.5mol/L NaCl溶液

      【配制方法】在800ml水中溶解292.2g NaCl加水定容至1L,分裝后高壓滅菌。

      28.10%十二烷基硫酸鈉(SDS)溶液

      【配制方法】在900ml水中溶解100g電泳級SDS,加熱至68℃助溶,加入幾滴濃鹽酸調節 溶液的pH值至7.2,加水定容至1L,分裝備用。

      【注意】SDS的微細晶粒易擴散,因此稱量時要戴面罩,稱量完畢后要清除殘留在稱量工作區和天平上的SDS,10%SDS溶液無須滅菌。

      29.20×SSC溶液

      【配制方法】在800ml水中溶解175.3g NaCl和88.2g檸檬酸鈉,加入數滴10mol/l NaOH溶液調節 pH值至7.0,加水定容至1L,分裝后高壓滅菌。

      30.20×SSPE溶液

      【配制方法】在800ml水中溶解17.5g NaCl、27.6g NaH2PO4?H2O和7.4g EDTA,用NaOH溶液調節 pH值至7.4(約需6.5ml 10ml/L NaOH),加水定容至1L,分裝后高壓滅菌。

      31.100%三氯乙酸溶液

      【配制方法】在裝有500g TCA的瓶中加入227ml水,形成的溶液含有100%(M/V)TCA。

      32.1mol/L Tris溶液

      【配制方法】在800ml水中溶解121.91g Tris堿,加入濃HCl調節 pH值至所需值。應使溶液冷至室溫后方可最后調定pH值,加水定容至1L,分裝后高壓滅菌。

      【注意】如1mol/L溶液呈現黃色,應予丟棄并置備質量更好的Tris。

      盡管多種類型的電極均不能準確測量Tris溶液的pH值,但仍可向大多數廠商購得合適的電極。Tris溶液的pH值因溫度而異,溫度每升高1℃,pH值大約降低0.03個單位。例如:0.05mol/L的溶液在5℃、25℃、和37℃時的pH值分別為9.5、8.9和8.6。

      33.Tris緩沖鹽溶液(TBS)(25mmol/l Tris)

      【配制方法】在800ml蒸餾水中溶解8g NaCl、0.2g KCl和3g Tris堿,加入0.015g酚并用HCl調至pH值至7.4,用蒸餾水定容至1L,分裝后在151bf/in2(1.034×105Pa)高壓下蒸汽滅菌20min,于室溫保存。

      34.配制:

      乙二胺四乙酸二鈉鹽滴定液(0.1mol/L)

      稱取乙二胺四乙酸二鈉鹽40g,加熱溶于1000ml水中,冷卻,搖勻。

      乙二胺四乙酸二鈉鹽滴定液(0.05mol/L)

      稱取乙二胺四乙酸二鈉鹽20g,加熱溶于1000ml水中,冷卻,搖勻。

      乙二胺四乙酸二鈉鹽滴定液(0.02mol/L)

      稱取乙二胺四乙酸二鈉鹽8g,加熱溶于1000ml水中,冷卻,搖勻。標定:

      標定:

      0.1mol/L乙二胺四乙酸二鈉鹽溶液,取于約800℃灼燒至恒重的基準氧化鋅0.25g±0.0001g,用少量水濕潤,加2ml稀鹽酸20%使其溶解,加水100ml,用10%氨水調至PH=7~8,加10ml氨—氯化銨(pH=10)及鉻黑T指示劑,用配制好的乙二胺四乙酸二鈉滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液由紫色變為純藍色。同時做空白。

      C(EDTA)——乙二胺四乙酸二鈉鹽標準溶液量濃度 mol/L

      V1——乙二胺四乙酸二鈉鹽標準溶液用量 ml

      V2——乙二胺四乙酸二鈉鹽標準溶液用量 ml

      0.08138——與1.00ml乙二胺四乙酸二鈉鹽標準溶液1.000mol/L相當的以克表示的氧化鋅的質量

      附:其他常用溶液的配制

      1.0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液

      【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na?2H2O),在磁力攪拌器上劇烈攪拌,用NaOH調節 溶液的pH值至8.0(約需20g NaOH顆粒)然后定容至1L,分裝后高壓滅菌備用。

      【注意】EDTA二鈉鹽需加入NaOH將溶液的pH值調至接近8.0,才能完全溶解。

      0. 1mol/l EDTA(pH8.0)溶液

      【配制方法】在800ml水中加入37.224g二水乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na?2H2O),在磁力攪拌器上劇烈攪拌,用2當量NaOH調節 溶液的pH值至8.0然后定容至1L。

      使用時稀釋一百倍變成1mMol/l EDTA工作液。PH值調至8

      2.磷酸鹽緩沖溶液(PBS)溶液

      【配制方法】在800ml蒸餾水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCl調節 溶液的pH值至7.4加水定容至1L,在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌20min。保存于室溫。

      3.Tris緩沖鹽溶液(TBS)(25mmol/l Tris)

      【配制方法】在800ml蒸餾水中溶解8g NaCl、0.2g KCl和3g Tris堿,加入0.015g酚并用HCl調至pH值至7.4,用蒸餾水定容至1L,分裝后在151bf/in2(1.034×105Pa)高壓下蒸汽滅菌20min,于室溫保存。

      Tris緩沖鹽溶液(TBS)(50mmol/l Tris PH7.6)

      Tris緩沖鹽溶液(TBS)(50mmol/l Tris)

      【配制方法】稱取Tris(三羥甲基氨基甲烷)6.057g,加少許雙蒸水溶解后加1HCL42ml,Nacl 8.5g,最后加雙蒸水至1000ml,用1N HCL或NAOH調至7.6,充分搖勻,4℃保存。


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