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  • 發布時間:2020-03-06 21:52 原文鏈接: 毛細血管血樣中麻醉劑的定量分析

    迄今為止,毛細血管血樣中的麻醉劑含量仍需通過尿樣進行測定,因此對尿樣弄虛作假的手段加以防范十分必要。本文建立了一種對毛細血管中的麻醉劑定量測定的新方法,僅一次分析即可對40種不同的毒品和藥物定性和定量,能夠妥善解決上述問題。

    對吸毒患者體內麻醉劑和藥物的測定,通常采用尿液作為樣品材料,然而這有可能出現弄虛作假的情況。同時,突發式的尿樣采集過程必須在監督下進行,這對受試者和醫生而言都是件不愉快的事情,也會浪費時間和人力。此外,這種定性檢驗的方法還不允許對患者在藥理學影響方面得出結論,因此還需要附加地進行靜脈抽血,可是又往往由于患者槽糕的靜脈血管狀況而變得十分困難。德國醫療服務中心(MVZ)下屬的聯合醫學實驗室(LADR)毒物學科組的Kramer博士及其在蓋斯特哈赫特科研中心的同事們,開發了一種從毛細管血樣中定量檢測麻醉劑的方法。

    LADR實驗室是德國唯一的能夠將質譜測定法作為毛細管血樣中麻醉劑和藥物例行分析方法的實驗室。目前每周大約分析100~200個樣品。作為歐洲最大的聯合醫學實驗室之一,LADR除了實驗室醫學這一重點之外,還提供有衛生、水、環境以及食品分析的服務。


    圖1. 用風險性微小的采樣方法作為常規靜脈采血法的替代方法:新的定量檢測方法借助于安全刺血針采集患者的毛細管血樣,置于特殊試管中,再送到實驗室分析。

    不同于尿樣采集法,毛細管血樣可以借助于安全刺血針立即進行采樣,并能接著用一種分析方法針對大約40種不同的毒品和藥物進行定性和定量檢測。由于連身處替代治療法中卻又偶爾再次吸毒的患者也能夠加以檢出,通過分析結果還可優化對仍有毒癮的患者的治療。

    尿液中毒品的免疫法檢測

    “對尿液中毒品的確證,通常先采用免疫法,再以色譜法加以補充和驗證。”LADR毒物學部門負責人Lars Wilhelm 博士如是稱。“不過這種免疫法僅具指導性作用,且只能檢驗成組的毒物”。由于對只對尿液進行定性分析,尚不能推斷出血液中的活性物質水平,因此很難對慢性患病者的檢驗結果進行累積性判斷。即便是針對唾液和頭發的分析,也于事無補。

    目前,對血液中物質的定量檢測尚需采集靜脈血液。“例如在針對美沙酮的治療學中的毒物進行監控時就是這樣做的。”自1995年起就致力于該檢測工作的實驗室主任Wilhelm進一步解釋道:“該方法的缺點在于,對艾滋病吸毒者的靜脈采血可能非常困難,這也是醫生們不愿意對美沙酮水平進行測定的原因”。


    圖2. 利用Helix Pormatia 蝸牛酶將樣品分解,并對堿性和中性物質液液萃取,再進行LC-MS/MS分析。

    毒物學工程師及LADR實驗室的工作小組,專門開發了一種超低風險的測定毛細管血中美沙酮的方法,旨在簡化采血操作,同時建立尿樣檢測的替代方法。“尿樣必須在監視下呈送,以防被人換掉或通過摻雜其他東西造假。”Wilhelm博士介紹,“由于很多患者不能或不愿意立即排尿,因而大大提高了診所的人力成本。而應用新方法,患者僅需借助于安全刺血針進行兩次各50μl的毛細管血液采樣,將其置于特殊準備的試管中,送到實驗室分析即可。”

    在MVZ毒物學實驗室中,Kramer 博士及其在蓋斯特哈赫特科研中心的同事,借助于Helix Pormatia蝸牛酶將樣品分解。加入氘化的內標之后,對堿性和中性物質進行液液萃取。有機相在通氮氣的條件下于55℃進行蒸發,再用流動相溶解。繼而進行LC-MS/MS分析。樣品制備需耗時約4~5h,進行LC-MS/MS分析時,每個樣品包括校準或質量控制需時15min。

    “將該方法成功地應用于美沙酮檢測后,對其他麻醉劑的分析也成為可能,其應用范圍將越來越大,靈敏度也將得到進一步的改善。”Kramer博士補充道。


    圖3. 采用LC-MS/MS法,對毛細管血樣進行一次分析就能測定40種不同的毒品和藥物,其中包括安非他命、苯二氮卓類、可卡因、阿片類及丁丙諾菲。

    據悉,采用該方法已能夠在一次分析中檢測出40種毒品和藥物,其中包括有:安非他命、苯二氮卓類、可卡因、阿片類以及丁丙諾菲。較之于目前尿樣檢驗加上靜脈采血這樣的檢測法而言,毛細管采血法不僅有效且省時,還可預防弄虛作假的情況發生,提供了具有法醫認定價值的結果。隨著質譜效率的不斷提高,該方法還將得到進一步的發展,以適應物質多樣性的檢驗以及個性化的需要。

    優化戒毒治療法

    通過量化的檢驗,毛細管血樣分析法還能對成癮患者的治療進行優化。“我們能夠證明,患者是否服用了藥物,服用什么藥物以及是否遵循了劑量服用。”Wilhelm博士解釋說。這樣就能使藥物適合個性化的要求,從而減少舊病復發的情況。“受益于這種簡化的過程,醫生可完成樣品的呈送并取得具有說服力的檢驗結果。”Wilhelm進一步介紹。“盡管如此,現在人們還依然視其為傳統方法的補充。

    測定毛細管血樣中的麻醉劑

    本文建立了一種毒品檢測的新方法,能夠定量測定毛細管血樣中的麻醉劑(BTM)和藥物。有別于尿樣法,新方法可借助于安全刺血針對毛細管血樣采樣,繼而通過一次分析對40種不同的毒品和藥物定性和定量,甚至還能對Beikonsum 進行檢驗,通過分析結果還可對成癮患者的治療進行優化。分析本身采用LC-MS/MS法來進行,樣品的制備耗時約4~5h,進行 LC-MS/MS分析時,每個樣品包括校準或質量控制需耗時15min。


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