生物安全柜知多少（二）

十、Ⅱ級B2型生物安全柜（全排式）及使用？

工作區域氣流全部來自實驗室或室外，排風經過高效過濾器過濾后直接排至室外，前窗操作口流入氣流的最低平均流速為0.50m/s；下降氣流來自經過高效過濾器過濾的實驗室或室外空氣(即安全柜排出的氣體不再循環使用)；流入氣流和下降氣流經過高效過濾器過濾后通過專用排氣管道(硬連接)排到大氣中， 不允許回到安全柜和實驗室中；100%氣流經過濾后外排；100%外界空氣補充；無循環使用的氣流。

用途：所有污染部位均處于負壓狀態或者被直接排氣（不在工作區循環）的負壓通道和負壓通風系統包圍。B2型安全柜可以用于以揮發性有毒化學品和放射性核素為輔助劑的微生物實驗。適用于生物安全1、2、3級的樣品。

十一、A型和B型生物安全柜的區別和使用？

十二、Ⅲ級生物安全柜及用途？

完全密閉、不泄露結構的通風柜能滿足操作生物危害等級Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級致病因子要求的生物安全柜。沒有開放式觀察窗，人員通過與柜體密閉連接的手套在安全柜內實施操作；安全柜內對實驗室的負壓應不低于120Pa；下降氣流經高效過濾器過濾后進入安全柜。排出氣流經兩道高效過濾器過濾后排至室外。100%氣流經過濾后外排進入環境、100%外界空氣補充、無循環使用的氣流。流入風速：≥0.7m/s，Ⅲ級生物安全柜為操作4級生物安全水平的微生物病原體設計。Ⅲ級安全柜通常只是在最高圍護功能的實驗室內安裝，這些實驗室具有控制出入和特殊通風要求或其它支持系統（例如高壓蒸汽）。

用途：用于操作危險度4級的微生物材料，可以提供最好的個體防護。所有接口都是密封的（只有通過連接在柜上的結實的橡膠手套，手才能伸到工作臺面），其送風經HEPA過濾，排風則經過兩個HEPA過濾器。

十三、如何正確使用生物安全柜？

（1）生物安全柜的垂直可移動窗開啟與關閉應輕便，在行程范圍內的任何位置不產生卡死現象，不應有明顯的左右或前后晃動現象，滑動應順暢。開關、按鍵的操作應靈活可靠，零部件應緊固無松動，指示正確。

（2）工作前預先放好實驗材料、不要放置過多器材

（3）從清潔區到污染區平行擺放、標本放左試劑等放右。

（4）在開始工作前到完成工作后，應至少讓安全柜工作4分鐘來完成“凈化”過程

（5）在工作區域工作、生物安全柜處于正常工作狀態時，不應有明顯的機震聲

（6）不阻斷前后空氣格柵、減少干擾氣流

（7）及時清潔和消毒溢出

（8）最好用一次性接種環、電加熱器滅菌接種環

（9）操作過程中廢棄物放在生物安全柜內

（10）不宜在生物安全柜內使用明火，明火易造成氣流動蕩，破壞高效過濾（HEPA）起源吹向臺面的模式

（11）按照使用說明書指導正確使用和維修

十四、如何進行工作前的自凈和消毒？

（1）在工作前要讓生物安全柜的風機至少運行3-5分鐘，使柜內的空氣實現自凈。

（2）安全柜的工作臺面、內壁（不包括送風濾器擴散板）和觀察窗的內表面用消毒劑擦拭。消毒后再用無菌蒸餾水進行擦拭以清除殘余消毒劑。

（3）放到安全柜的容器和材料的表面使用70%乙醇擦拭，以減少將環境的雜菌帶到安全柜內。

（4）定期對孵箱和冰箱進行消毒。

十五、如何對工作結束時的表面消毒？

工作完成時，所有的容器和設備應該進行表面消毒并拿出安全柜。 在每天工作結束時，應該對安全柜進行最后的表面消毒，包括工作臺面、安全柜的邊壁、后壁和觀察窗玻璃內部的擦拭。如果必要，安全柜也應進行放射性檢測并進行必要的消毒。作為安全的微生物學操作的最后步驟，操作者應該摘下手套、脫下工作服并且洗手。

十六、發生少量噴灑時的如何消毒？

在生物安全柜內發生少量的噴灑時，應用污吸濕材料立即進行處理，并將使用過的紙巾放到生物危害包里。對安全柜內的所有物品和安全柜內部，用浸滿消毒液的毛巾立即進行擦拭消毒。

十七、發生大量溢出時的如何消毒？

當發生大量的溢出時，液體會通過前面或后部的格柵流到下面去，這時要求更廣泛的消毒。安全柜內的所有的物品應該進行表面消毒并拿出安全柜。使消毒液維持30分鐘的適當接觸時間。如果溢出的液體含有放射性材料，可采取類似的程序。并應該與輻射安全人員聯系，尋求特殊的指導。

十八、生物安全柜的如何日常維護？

（1）定期清潔操作臺面和前窗玻璃；

（2）保持室內空氣質量,延長高效過濾器使用壽命；

（3）定期檢測紫外燈的照射強度,及時更換燈管；

（4）長期不用應定期進行維護性運行；

（5）高效過濾器應定期檢測，及時更換；

（6）做好使用和維護記錄

十九、生物安全柜的檢測要求？

根據WS 233-2002《微生物和生物醫學實驗室生物安全通用準則》 的相關規定：有下列情況之一時，必須對Ⅱ級生物安全柜進行現場檢測 :

（1）實驗室施工時，Ⅱ級生物安全柜搬放到指定位置后。

（2） Ⅱ級生物安全柜被移動位置后。

（3） 對Ⅱ級生物安全柜進行檢修后。

（4） Ⅱ級生物安全柜更換高效過濾器后。

（5） Ⅱ級生物安全柜一年一度的常規現場檢測

二十、生物安全柜分類比較