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  • 發布時間:2020-03-23 23:35 原文鏈接: 毛細管電泳儀中的毛細管表示什么?

    糖類化合物、硫化物、胺類和氨基酸等 可用間接電化學法測定沒有電活性的物質 適用的毛細管電泳分離模式 毛細管區帶電泳(CZE) 膠束電動毛細管色譜(MECC) 微乳液毛細管電動色譜(MEEKC) 毛細管離子分析(CIA) 高效毛細管電泳儀儀器。

    電泳儀是利用電泳技術實現對不同物質進行定性、定量分析,或將一定混合物進行組份分析或單個組份的提取制備設備。所謂電泳技術,是指帶電粒子在電場中的運動,不同物質由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場中運動速度不同,根據這一特征對不同物質進行定性、定量分析和對組份的提取制備。

    毛細管電泳是以彈性石英毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,依據樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現分離的電泳分離分析方法。

    毛細管電泳所用的石英毛細管柱,在pH值>3的情況下,其內表面帶負電,與緩沖液接觸時形成雙電層,在高壓電場作用下,形成雙電層一側的緩沖液由于帶正電而向負極方向移動,從而形成電滲流。同時,在緩沖溶液中,帶電粒子在電場作用下,以各自不同速度向其所帶電荷極性相反方向移動,形成電泳。帶電粒子在毛細管緩沖液中的遷移速度等于電泳和電滲流的矢量和。各種粒子由于所帶電荷多少、質量、體積以及形狀不同等因素引起遷移速度不同而實現分離。

    毛細管電泳的分離模式可分為:毛細管區帶電泳、毛細管凝膠電泳、膠束電動毛細管色譜、親和毛細管電泳、毛細管電色譜、毛細管等電聚集電泳、毛細管等速電泳。

    (1)毛細管區帶電泳:用以分析帶電溶質,為了降低電滲流和吸附現象,可將毛細管內壁涂層。

    (2)毛細管凝膠電泳:在毛細管中裝入單體,引發聚合形成凝膠,主要用于測定蛋白質、DNA等大分子化合物。另有將聚合物溶液等具有篩分作用的物質,如葡聚糖、聚環氧乙烷,裝人毛細管中進行分析,稱毛細管無膠篩分電泳,故有時將此種模式總稱為毛細管篩分電泳,下分為凝膠和無膠篩分兩類。

    (3)膠束電動毛細管色:在緩沖液中加入離子型表面活性劑如十二烷基硫酸鈉,形成膠束,被分離物質在水相和膠束相(準固定相)之間發生分配并隨電滲流在毛細管內遷移,達到分離。本模式能用于中性物質的分離。

    (4)親和毛細管電泳:在毛細管內壁涂布或在凝膠中加入親和配基,以親和力的不同達到分離目的。

    (5)毛細管電色譜:是將HPLC的固定相填充到毛細管中或在毛細管內壁涂布固定相,以電滲流為流動相驅動力的色譜過程,此模式兼具電泳和液相色譜的分離機制。

    (6)毛細管等電聚焦電泳:是通過內壁涂層使電滲流減到最小,再將樣品和兩性電解質混合進樣,兩個電極槽中分別為酸和堿,加高電壓后,在毛細管內建立了pH梯度,溶質在毛細管中遷移至各自的等電點,形成明顯區帶,聚焦后用壓力或改變檢測器末端電極槽儲液的pH值使溶質通過檢測器。

    (7)毛細管等速電泳:采用先導電解質和后繼電解質,使溶質按其電泳倘度不同得以分離。

    電極槽和毛細管內的溶液為緩沖液,可以加入有機溶劑作為改性劑,以及加入表面活性劑,稱作運行緩沖液。運行緩沖液使用前應脫氣。電泳譜中各成分的出峰時間稱遷移時間。膠束電動毛細管色譜中的膠束相當于液相色譜的固定相,但它在毛細管內隨電滲流遷移,故容量因子為無窮大的成分最終也隨膠束流出。其他各種參數都與液相色譜所用的相同。

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