摘 要 本文介紹了高速逆流色譜技術的工作原理、特點，綜述了近年來高速逆流色譜(HSCCC)在分離制備天然產物、蛋白質、抗生素、無機物等領域的進展，尤其是近幾年在中藥尤其是植物藥有效成分分離純化方面的應用情況，總結了適用于HSCCC的溶劑體系，并展望了HSCCC與質譜、蒸發光散射聯用等新技術的應用前景。
關鍵詞 高速逆流色譜，溶劑選擇，天然產物，抗生素，蛋白質，無機物，質譜，蒸發光散射
1 引 言
高速逆流色譜(high-speed countercurrent chromatography，簡稱HSCCC) 是一種較新型的液—液分配色譜,由美國國立健康研究院（National Institute of Health, U.S.A.）Ito博土最先研制開發，其原理是基于樣品在旋轉螺旋管內的互不混溶的兩相溶劑間分配不同而獲得分離，因而無須任何固體載體或支撐體，能達到在短時間內實現高效分離和制備，并且可以達到幾千個理論塔板數。與其他柱色譜相比較，它克服了固定相載體帶來的樣品吸附、損失、污染和峰形施尾等缺點[3]。目前此項技術已被應用于生化、生物工程、醫藥、天然產物化學、有機合成、環境分析、食品、地質、材料等領域[5]。我國是繼美國、日本之后最早開展逆流色譜應用的國家，俄羅斯、法國、英國、瑞士等國也都開展了此項研究。美國FDA及世界衛生組織（WHO）都引用此項技術作為抗生素成分的分離檢定，90年代以來，高速逆流色譜被廣泛地應用于天然藥物成分的分離制備和分析檢定中。本文對高速逆流色譜的原理特點及應用作一綜述。
2 高速逆流色譜儀及溶劑體系簡介
2.1 高速逆流色譜儀原理及特點
HSCCC利用了一種特殊的流體動力學(單向流體動力學平衡)現象。具體表現為一根100多米長的螺旋空管，注入互不相溶的兩相溶劑中的一相作為固定相，然后作行星運動；同時不斷注入另一相（流動相），由于行星運動產生的離心力場使得固定相保留在螺旋管內，流動相則不斷穿透固定相；這樣兩相溶劑在螺旋管中實現高效的接觸、混合、分配和傳遞。由于樣品中各組分在兩相中的分配比不同，因而能使樣品中各組分得到分離。
2.2 HSCCC的優點
HSCCC主要具有以下幾個方面的優點。
2.2.1 應用范圍廣，適應性好。由于溶劑系統的組成與配比可以是無限多的，因而從理論上講HSCCC適用于任何極性范圍的樣品的分離，
所以在分離天然化合物方面具有其獨到之處。并因不需固體載體，而消除了氣液色譜中由于使用載體而帶來的吸附現象，特別適用于分離極性物質和其它具有生物活性的物質。
2.2.2 操作簡便，容易掌握。分離過程中對樣品的前處理要求低，僅需一般的粗提物即可進行HSCCC的制備分離或分析。
2.2.3 回收率高。由于沒有固體載體，不存在吸附、降解和污染，理論上樣品的回收率可達100％。在實驗中只要調整好分離條件，一般都有很高的回收率。
2.2.4 重現性好。如果樣品不具有較強的表面活性作用，酸堿性也不強，那么多次進樣，其分離過程穩定性都保持很好、峰的保留相對標準偏差也小于2%，重現性相當好。
2.2.5 分離效率高，分離量較大。由于其與一般色譜的分離方式不同，能實現梯度操作和反相操作、亦能進行重復進樣，使其特別適用于制備性分離，產品純度高。研究結果表明:一臺普通的高速逆流色譜儀一次進樣可達幾十毫升，一次可分離近10g的樣品。因此，在80年代后期被廣泛地應用于植物化學成分的分離制備研究。
最初的高速逆流色譜儀只有一個分離柱，用配重平衡離心體系。最近的儀器在設計上有較大突破，采用多個分離柱，不用配重，性能和實用能力大大提高。目前高速逆流色譜儀有分析型和半制備、制備型三大系列，較大的制備型HSCCC，柱容積可達1000mL，一次最多進樣可達20g粗品。不但適用于非極性化合物的分離，也適用于極性化合物的分離，對檢測器的靈敏度要求不高。在制備分離方面，可用于天然產物中各組分的分離，也可進一步精制，甚至直接從粗提物一步純化到純品。
