1、滅菌方法系利用不加壓力的蒸氣滅菌，某些物質經高壓蒸氣滅菌容易破壞，可用此法滅菌。
（1）將欲滅菌物品置于鍋內，蓋上頂蓋，打開排水口，使器內余水排盡。
（2）關閉排水口，打開進氣門，根據需要消毒10～20min。
（3）滅菌完畢關閉進氣門，取出物品待冷至室溫溫度，放入37℃溫箱過夜，次日仍按上述方法消毒，如此三次，即可達到滅菌目的。
2、血清凝固器使用方法，培養基中含有血清或雞蛋特殊成份時，因高熱會破壞其營 養成份，故用低溫，可使血清凝固，又可達到滅菌目的。
（1）在使用該法滅菌的血清等分裝時，需嚴格遵守無菌操作，試管、平皿也經滅菌后使用。
（2）將培養基按要求使成斜面或高層，加足水后，接上電源，升溫75～90℃1h滅菌，放37℃溫箱過夜，再如此滅菌三次。
3、煮沸消毒：可用煮鍋或煮沸消毒器，水沸騰后再煮5～15 min，也可在水中加入2%石炭酸煮沸5 min，加入0.02%甲醛，80℃煮60 min均可達到滅菌目的， 但選用 煮沸消毒的增消劑時， 應注意對物品的腐蝕性。
4、滅菌處理：滅菌后物品，按正常情況已屬無菌，從滅菌器中取出應仔細檢查放置，以免再度污染。
（1）物品取出，隨即檢查包裝的完整性，若有破壞或棉塞脫掉，不可作為無菌物品使用。
（2）取出的物品，如為包裝有明顯的水浸者，不可作為無菌物品使用。
（3）培養基或試劑等，應檢查是否符合達到滅菌后的色澤或狀態，未達到者應廢棄。
（4）啟閉式容器，在取出時應將篩孔關閉。
（5）取出的物品掉落在地或誤放不潔這處，或沾有水液，均視為受到污染，不可作為無 菌物品使用。
（6）取出的合格滅菌物品，應存放于貯藏室或防塵柜內，嚴禁與未滅菌物品混放。
（7）凡屬合格物品，應標有滅菌日期及有效期限。
（8）每批滅菌處理完成后，記錄滅菌品名、數量、溫度、時間、操作者。