Myc 標簽融合蛋白 - 檢測,封閉
Myc Tag來源于c-myc基因表達產物,其序列為EQKLISEEDL。以高親和力聞名的Myc Tag的單克隆抗體(克隆號2D5),可以檢測天然和變性的Myc融 合蛋白,被廣泛用于WB、IF、IP實驗。在天然洗脫條件下,使用Myc標簽多 肽來與重組蛋白進行競爭,可溫和洗脫Myc標簽蛋白質。
Fig.1. Immunofluorescence staining (1:2,000) of Myc fusion protein in 293 cells with red and counterstained with DAPI.
Fig.2.Western blot analysis of 1ug Myc fusion protein with Anti-Myc mouse monoclonal antibody (2D5) in 1:5,000 dilution (lane A) and 1:10,000 dilution (lane B).
Fig.3.IP (1:200) - WB (1:5,000) analysis of Myc fusion protein expression in 293 cells. Untransfected 293 cell lysate (lane A), transfected 293 cell lysate with Myc-tag protein (lane B); IP transfected 293 cell lysate with normal Mouse IgG (lane C) or with Anti Myc tag mAb (lane D) , and without both normal Mouse IgG and Myc tag mAb (lane E).
在1985年開發出鼠抗c-myc標簽抗體并被作為免疫化學試劑用于細胞生物學和蛋白質工程領域中。Myc標簽相當于人的c-Myc 410-419位肽段( 序列為:EQKLISEEDL)。Myc標簽可放在C端或N端,但Myc重組蛋白的低pH洗脫條件往往會降低蛋白質的活力,因此Myc標簽系統廣泛應用于檢測但很少用于純化。Myc標簽已成功應用于WB雜交技術、免疫沉淀IP和流式細胞術中。因此可用于檢測重組蛋白在細菌、酵母、昆蟲細胞和哺乳細胞中的表達情況。