QExactiveFocus結合CompoundDiscoverer實現泮托拉唑...（一）

Q Exactive Focus 結合 Compound Discoverer實現泮托拉唑雜質譜分析

關鍵詞

藥物雜質鑒定；Compound Discoverer；Q Exactive Focus；靜 電場軌道阱高分辨質譜

1.引言

任何影響藥物純度的物質統稱為雜質。人用藥物注冊技術要求 國際協調會（簡稱 ICH）對雜質的定義為藥物中存在的，化學 結構與該藥物不一致的任何成分。藥物中含有雜質會降低療 效，影響藥物的穩定性，有的甚至對人體健康有害或產生其他 毒副作用。因此，檢測有關物質，控制純度對確保用藥安全有 效，對保證藥物質量非常重要。

質譜技術因其快速、高靈敏度和高專屬性的分析能力，已經被廣泛的應用于藥物雜質鑒定，OrbitrapTM 靜電場軌道阱高分辨 質譜具有超高的分辨率和長期穩定的高質量精度，可獲得高質 量的一級和多級高分辨質譜數據，保證了鑒定結果的可靠性， 被越來越多的應用于定性分析中。

本文采用Thermo Scienti?cTM高效液相色譜-四極桿靜電場軌道阱 Q Exactive? Focus 高分辨質譜聯用技術對藥物泮托拉唑進行 了全面的雜質數據采集，利用高性能四極桿對目標化合物進行 高專屬性選擇，HCD 高能碰撞池進行二級碰撞碎裂，Orbitrap 靜電場軌道阱采集一級和二級高分辨質譜數據。結合 Thermo 新一代的智能小分子化合物分析軟件 Compound Discoverer?， 以高度靈活的自定義方式制定了泮托拉唑雜質分析工作流程（ 圖 1）。

圖 1. 基于 Q Exactive Focus 和 Compound Discoverer 的雜質鑒定流程

2.實驗條件

2.1 液相色譜條件：

儀器：Thermo Scienti?cTM UltiMateTM 3000 超高效液相色譜儀

色譜柱：Hypersil Gold C18 (100×2.1 mm, 1.9 μm)

流動相：A 為水相：0.1% 甲酸水；B為有機相：乙腈

梯度條件：

2.2 質譜條件

儀器：Thermo Scienti?cTM Q Exactive Focus 四極桿靜電場軌道阱 高分辨串聯質譜。HESI 離子源參數：Spray Voltage +3.5 KV、2.8 KV，快速正負切換；Sheath Gas Pressure: 40arb；Aux Gas Pressure: 10arb；Capillary Temp: 300℃；Heater Temp: 350℃

質譜掃描參數：全掃描范圍 150–800 m/z，分辨率 70,000 FWHM；二級：Discovery 數據依賴自動觸發；母離子隔離窗 口 0.4 amu、4.0 amu；分辨率 17,500、70,000 FWHM。

2.3 樣品制備

取泮托拉唑影響因素樣品適量，加乙腈：水（50:50）稀釋至 0.2 mg/mL 后進樣分析。

3．結果

3.1 Q Exactive Focus 提供優質、全面、高效的原始數據

3.1.1 快速正負切換提升化合物鑒定覆蓋率

Q Exactive Focus 具有快速、高效的正負切換能力。以圖 2 中 7.16 min 的色譜峰為例，正離子模式下檢測到 336.11500 m/z 雜質的 [M+H]+ 信號，在負離子模式下除了檢測到相應的 334.10177 m/z [M-H]- 信號外，還檢測到另一雜質 320.08543 m/z 的 [M'-H]- 信號，表明快速的正負切換采集模式可以同時 獲得正離子和負離子雜質的全面信息，同時由圖 1 質量偏差可 見，無論是正離子還是負離子模式，Q Exactive Focus 都能保 持優秀的質量精度，為準確鑒定提供了有力的保障。

圖 2. 快速正負切換檢測不同性質雜質