補體系統是先天免疫的一個重要因素。在補體激活補體蛋白5(C5)的過程中,C5被蛋白酶水解形成肽段 C5a。C5a是由74個氨基酸組成的多肽(大小11KD),來自α鏈的N端。C5a的生命是非常短暫的,在血清中快速裂解為更穩定但仍有生物活性的C5a-desArg(也叫做酰化刺激蛋白,ASP)。因此,測定C5a-desArg含量來表示樣本補體激活水平是可靠的。
C5a作為強有力的過敏毒素可引起平滑肌收縮、血管擴張、血管通透性增加、嗜堿細胞和肥大細胞脫顆粒及溶酶體酶釋放。此外,C5a是嗜酸性粒細胞、嗜堿粒細胞和單核細胞潛在的趨化因子。
C5a參與的炎癥反應包括:革蘭氏陰性細菌引起的敗血癥、創傷、缺血性心臟病、透析后綜合癥和多種自身免疫性疾病。C5a的升高可提示動脈粥樣硬化的病人患心血管疾病的風險增加。此外,C5a與骨髓移植后白血病兒童的毛細血管滲漏綜合征密切相關。尿液中的C5a含量可預測腎移植術后急性排斥反應的發生。
圖1:補體活化途徑
如何快速、方便、有效的定量人血清、血漿中的C5a/C5a-desArg?
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產品名稱及描述 | 品牌 | 貨號 | 產品說明 |
C5a, Human, ELISA kit | Hycult | HK349 | 詳情 |
酶標板上預先包被能識別人C5a蛋白的抗體,生物素標記的抗體將與捕獲的人C5a蛋白結合,鏈霉親合素過氧化物酶標記物與生物素示蹤物結合。最終,測定反應產物在450nm處的吸光值。
圖2:C5a, Human, ELISA kit操作流程
. 整個實驗操作時間為3.5個小時
. 最低檢測值為0.3ng/ml
. 可檢測的范圍從0.3ng/ml到20ng/ml
. 與小鼠、馬C5a、人C3a無交叉反應,與兔、大鼠、豬C5a有輕微交叉反應
. 試劑盒含12個8孔板,實驗更加靈活
. 每孔所需樣品量為100ul
C5a, Human, ELISA kit結果展示:
使用人C5a ELISA檢測試劑盒得到的標準曲線,斜率為1.0907,相關系數為0.9988。