體內PARP抑制劑篩選

PARP (poly ADP-ribose polymerase)是存在于多數真核細胞中的一個多功能蛋白質翻譯后修飾酶。當DNA損傷時，PARP能以NAD+依賴的形式催化多聚ADP核糖往自身以及鄰近的組蛋白等核蛋白聚合，從而參與到DNA堿基切除修復的一系列事件中。當胞內的NAD+庫大量消除時，將引起PARP介導的壞死誘導，其中PARP-1的剪切則通過阻止DNA修復以及阻斷壞死的能量供應來促使凋亡，實驗證明，抑制PARP可以防止心肌和神經缺血、糖尿病、敗血病、中風等疾病中的組織損傷，甚至有助于腫瘤治療中的化療、放療增敏。

PARP參與到DNA堿基切除修復的一系列事件中。嚴重的胞內NAD+庫的消除將引起PARP介導的壞死誘導，然而PARP-1的剪切則通過阻止DNA修復誘導的存活以及阻斷壞死的能量供應來促使凋亡。此外，抑制PARP可促進腫瘤的化療和放療敏感。鑒于不同個體和細胞內PARP活性檢測的必要性，Trevigen創新性的開發了高通量PARP體內藥理動力學II代試劑盒，用來檢測組織和細胞提取液中PAR的水平，并用于記錄腫瘤裂解液、器官間PAR水平的差異。

Trevigen 高通量通用PARP分析試劑盒通過檢測96孔板上生物素標記的多聚ADP核糖聚合到鄰近組蛋白的反應，從而確定已知的或可能的PARP抑制劑。該試劑盒開發了預包被PAR單克隆抗體的96孔板作為捕獲抗體，能夠捕獲到細胞內的PAR和PAR結合蛋白，用抗-PAR多克隆兔源抗體作為檢測抗體孵育，用HRP標記山羊抗兔與之特異性結合，化學發光法HRP底物產生檢測信號，其光強度單位（light units，RLU)即反映了細胞內PAR水平。

本試劑盒特點：

1、化學發光法檢測，無放射性；

2、預包被的96孔抗體捕獲板；

3、高信號率；

4、2 pg/ml PAR的檢測靈敏度；

5、寬至1,000 pg/ml的線性動態范圍；

6、降低了分析間的變異性；

7、合理檢測體內以及體外環境中藥物對PARP作用。