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  • 發布時間:2020-06-15 12:11 原文鏈接: ELISA實驗標本的采集、處理和保存

    ELISA實驗標本的采集、處理和保存

     

    能夠應用ELISA 實驗的樣本種類很多,有血清,血漿,細胞上清,細胞裂解液,尿液,關節滑液,腦脊液,肺泡灌洗液,各種組織的組織勻漿;采集和處理的方式都不相同。下面就列出了BioTNT 收集的給類樣本的采集、處理和保存方式。方法大多出自文獻和試劑盒說明書,部分方法經BioTNT 驗證過,但有的方法并沒有實際操作過,所以,以下方法僅供參考。

     

    一、ELISA實驗中血清的采集、處理和保存;

    1、 真空采血針采集2ml新鮮血液,加入無菌試管中;

    2、 采血后室溫靜置1小時;

    3、 將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。

    4、 取上清。 分裝凍存備用,

    2-8℃下,可放置保存24-48小時;

    -20℃下,可放置保存1個月;

    -70℃下,可放置保存6個月;

    5、 根據你的實驗需要,取適量上清夜進行各種ELISA測定。

    大部分ELISA檢測均以血清為標本。血清標本可按常規方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP為標記的 ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。此外還應避免細菌污染,因為菌體中可能含有含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。血清標本宜在新鮮 時檢測。如在冰箱中保存過久,其中的可發生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。

    二、ELISA實驗中血漿的采集、處理和保存;

    1、 真空采血針采集2ml新鮮血液,加入無菌試管中;

    2、 按1:9加入抗凝劑(EDTA、草酸鈉、肝素、枸櫞酸鈉),30分鐘內于冰上分離血漿以減少血小板的污染;(也可以直接用抗凝管采集);

    3、 將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心5min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。

    4、 取上清。 分裝凍存備用,

    2-8℃下,可放置保存24-48小時;

    -20℃下,可放置保存1個月;

    -70℃下,可放置保存6個月;

    5、 根據你的實驗需要,取適量上清夜進行各種ELISA測定。 請注意指標說明書上對于抗凝血劑是否有特殊要求,建議使用EDTA。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。

    注意事項:制備血漿標本需借助于抗凝劑EDTA,抗凝不完全的標本因纖維蛋白原干擾而造成假陽性。

    三、ELISA 實驗中尿液的采集、處理和保存;

    1、 采集尿液樣本500ul,加入無菌試管中;

    2、 將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的樣本留上清,棄下面沉淀。

    3、 取上清。 分裝凍存備用,

    2-8℃下,可放置保存24-48小時;

    -20℃下,可放置保存1個月;

    -70℃下,可放置保存6個月;

    4、 根據你的實驗需要,取適量上清夜進行各種ELISA測定。

    四、ELISA 實驗中腦脊液的采集、處理和保存;

    1、采集腦脊液樣本,加入無菌試管中;

    2、將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的樣本留上清,棄下面沉淀。

    3、取上清。 分裝凍存備用,

    2-8℃下,可放置保存24-48小時;

    -20℃下,可放置保存1個月;

    -70℃下,可放置保存6個月;

    4、根據你的實驗需要,取適量上清夜進行各種ELISA測定。

    五、ELISA 實驗中細胞上清液的采集、處理和保存;

    1、采集細胞培養上清液500ul,加入無菌試管中;

    2、將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的勻漿留上清


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