應用優勢
ACQUITY? SQD質譜儀
關鍵詞
UPC2，藥物雜質，穩定性指示方法，降解分析，方法開發，甲氧氯普胺，合相色譜
簡介
超高效合相色譜 (UPC2?)以亞2 μm顆粒為固定相，采用超臨界流體二氧化碳作為主要流動相成分。合相色譜是一種使用少量溶劑即可實現高速分析的分析工具，尤其是在分析雜質時，相比于反向液相色譜(LC)，合相色譜的正交方法更有利于發現未知雜質。合相色譜的方法開發不同于液相和氣相色譜的方法開發策略，后者已經基本成熟。為了簡化這個過程，我們需要研究一種系統的方法，用于開發非手性物質的合相色譜方法。
了解藥品和藥物材料中的雜質分布是一個重要步驟，樣品純度的評估可幫助制藥公司在藥物開發過程中做出決策，推進藥物上市進程。雜質分布將確定供應商所提供原材料的質量、成品的保質期、合成途徑和防止偽造的知識產權保護。色譜圖的正交對比有助于生產商作出最明智的決策。在本應用紀要中，實驗采用ACQUITY UPC2系統分析甲氧氯普胺及其相關雜質。如圖1所示，甲氧氯普胺（胃復安）是一種止吐藥，可以治療胃灼熱、胃潰瘍以及由化療導致的惡心。方法開發研究了色譜柱和溶劑，以確定優化特異性和峰形的合適方法條件。
圖1. 甲氧氯普胺的化學結構。
實驗
UPC2條件
系統： 配備PDA和SQD檢測器的ACQUITYUPC2系統
色譜柱： ACQUITYUPC2BEH2-EP
3.0×100mm，1.7μm
流動相A： CO2
流動相B：含1g/L甲酸銨的甲醇/乙腈(50:50)溶液，加2%的甲酸
清洗溶劑： 70:30的甲醇/異丙醇
分離模式：梯度；溶劑B在5.0min
內由2%增加至30%；
達到30%后，保持1min
流速： 2.0mL/min
CCM反壓： 1500psi
柱溫： 50℃
樣品溫度： 10℃
進樣體積： 1.0μL
運行時間： 6.0min
檢測條件： PDA3D通道：PDA，200到410nm；20Hz
PDA2D通道：270nm，4.8nm分辨率（補償500到600nm）
SQDMS：150到1200Da；ESi+和ESi-
補液流速： 不需要
數據管理：Empower3軟件
樣品描述
分離度溶液由甲氧氯普胺和八種相關雜質制備而成，將其置于TruView?最大回收樣品瓶中等待進樣，如表1所示。雜質的濃度為甲氧氯普胺標準品濃度的0.1% w/w。分離度溶液用于色譜分析方法開發。
峰編號 | 名稱 | 分子量 | EP參考 |
甲氧氯普胺(4-氨基-5-氯-N-(2-(二乙氨基)乙基)-2-甲氧基苯甲酰胺 | 299.8 | ||
1 | 4-氨基-5-氯-2-甲氧基苯甲酸 | 201.6 | (EP C) |
2 | 4-(乙酰氨基)-2-羥基苯甲酸 | 195.2 | (EP H) |
3 | 4-氨基-5-氯-N-2-（二乙氨乙基）-2-甲氧基苯甲酰胺 N-氧化物 | 315.8 | (EP G) |
4 | 4-氨基-5-氯-N-2-（二乙氨乙基）-2-羥基苯甲酰胺 | 285.8 | (EP F) |
5 | 4-(乙酰氨基)-5-氯-N-2-(二乙氨乙基)-2-甲氧基苯甲酰胺 | 341.8 | (EP A) |
6 | 4-(乙酰氨基)-2-甲氧基苯甲酸甲酯 | 223.2 | (EP D) |
8 | 4-(乙酰氨基)-5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯 | 257.7 | (EP B) |
9 | 4-氨基-2-甲氧基苯甲酸甲酯 | 181.1 |
表1. 甲氧氯普胺雜質標準品、峰的名稱、質量數和歐洲藥典分類列表。
正交法進行藥物雜質分析
用于藥物雜質分析的 UPC2 方法
對雜質采用超臨界流體色譜分析符合 ICH 指南和法規要求
沃特世解決方案
ACQUITY UPC2?系統
ACQUITY UPC2色譜柱套裝
Empower? 3軟件