預期用途
此BIOSERV 胰腺彈性蛋白酶ELISA檢測試劑盒能用于糞便樣品中胰腺彈性蛋白酶的定量檢測,作為胰腺外分沁功能的輔助檢測工具.
簡介及臨床意義
用于慢性胰腺炎, 囊胞性纖維癥, 糖尿病, 舒瓦克曼綜合征等疾病引起胰腺分泌不足的體外診斷. 本試劑盒能用于定量檢測糞便樣本中胰腺彈性蛋白酶的含量,作為胰腺分泌不足的輔助檢測. 胰腺彈性蛋白酶ELISA 已經過FDA注冊認證.
此BIOSERV胰腺彈性蛋白酶ELISA檢測試劑盒基于’’三明治”夾心法原理, 用于胰腺外分沁不足的體外診斷.
實驗原理
BIOSERV 胰腺彈性蛋白酶ELISA檢測試劑盒基于’’三明治”夾心法原理, 采用2種特異性識別人胰腺彈性蛋白酶表面決定簇的多克隆抗體. 試劑盒微孔中預包被有能特異性結合樣品或標準品中的胰腺彈性蛋白酶抗體. 加樣后,再加入生物素標記抗體,結合到固相的胰腺彈性蛋白酶. 再加入鏈霉親和素標記辣根過氧化酶結合物, 催化TMB底物液. 加入0.25 mol/l 的硫酸終止酶反應.最后在酶標儀450 nm讀取其吸光度.
試劑
足夠用于96人份檢測
1參考標準品(即用)-每瓶 0.7 ml
-標準品1(50 μg彈性蛋白酶/g-無色蓋)
-標準品2(100μg彈性蛋白酶/g-白色蓋)
-標準品3(200 μg彈性蛋白酶/g-黃色蓋)
-標準品4(500 μg彈性蛋白酶/g-藍色蓋)
2質控
1 (約90 μg彈性蛋白酶/g±20%-棕色蓋) 0.7 ml
含0.2%疊氮化鈉
3質控2 (約200 μg彈性蛋白酶/g±20%-綠色蓋) 0.7 ml
含0.2%疊氮化鈉
4洗滌液(10倍濃縮) 2 x 50 ml
5提取緩沖液(10倍濃縮) 50 ml
6 生物素化抗體(二抗- 紅色蓋) 0.12 ml
7鏈霉親和素-過氧化酶結合物(即用) 8 ml
8底物液 (TMB底物液,即用) 13 ml
9終止液 (0.25 mol/l H2SO4,即用) 13 ml
10微孔反應板,包被有多克隆抗彈性蛋白抗體 96 孔
11 單條固定架
實驗所需器材(但實驗盒沒有提供)
1帶450nm過濾裝置,可選550 nm.的酶標儀
2帶一次性吸嘴的微移液管: 5 μl, 50 μl, 100 μl 和1000 μl.
3試管
4蒸餾水或去離子水
5吸水紙
注意事項
1試劑盒僅供體外診斷用
2避免接觸終止液,終止液會刺激和灼傷皮膚
3切勿用嘴移液
4請使用標準的移液管和儀器
5小心處理樣品并視其為潛在感染物質
6根據國家生物危害安全條例及規范處理及使用
存儲說明及保質期
1試劑存儲于2 – 8 °C (36 °F – 46 °F),避免冰凍試劑盒或其成分
2未開封的試劑盒于有效期內穩定
請注意:如果試劑盒被開封使用, 剩余未用試劑盒可能會短于標簽上的有效期.所有成分在使用后都應密封保存于2-8 °C并于4周內用完. 否則可能會導致結果的差異.
3 稀釋洗滌液于2 °C – 8 °C / 36 °F – 46 °F可穩定保存4周
4稀釋提取緩沖液于2 °C – 8 °C / 36 °F – 46 °F可穩定保存4周
5 使用后應立即蓋上蓋子
6 微孔反應板應于含有干燥劑的袋子保存. 未使用的微孔反應板應重新密封于含有干燥劑的袋子中. 這種存儲條件下,開封的試劑盒至少能保存4周.
樣品
人糞便
樣品收集及準備
1使用新鮮準備的糞便樣品. 小心處理,視其為可感染物質.
2樣品在不同的溫度下存儲的不同保質期
室溫至40 °C (104 °F): 保存5天
(2 °C – 8 °C / 36 °F – 46 °F): 保存1周
(-18 °C – -20 °C / 0 °F – -4 °F): 保存1年
糞便樣品準備
1提取緩沖液的準備(10倍濃縮)
用蒸餾水或去離子水按1:10的比例稀釋提取緩沖液.(即50 ml + 450 ml), 稀釋提取緩沖液置2-8 °C下可保存至有效期
2 糞便樣品稱重
-稱取30–100 mg(天平靈敏度達1 mg)糞便樣品置于12 ml 的試管中.再用1 ml 的稀釋提取液稀釋10 mg 的糞便樣品.(例: 70 mg樣品+7ml 稀釋緩沖液,83 mg樣品+8.3ml 稀釋緩沖液)
-使用漩渦混合儀充分混勻.(約2分鐘),待固定成分沉淀.(至少30分鐘),最后取其上清液用于實驗檢測. 2-8 °C下過夜提取可得到最優實驗結果
請注意:如果提供緩沖液或洗液液出現鹽結晶,使用前于30-35 °C水浴加熱混合溶解.
實驗上清液可置于-18 °保存4周.
