一、無菌操作規定
1. 打疫苗病菌時務必穿工作服裝、戴工作帽。
2. 開展打疫苗食品類試品時，務必穿專用型的工作服裝、帽及涼拖，應放到無菌車間緩存間， 工作中前經紫外線消毒后應用。
3. 打疫苗食品類試品時，應在進無菌車間前要香皂冼手，隨后用75％乙醇藥棉將手擦整潔。
4. 開展打疫苗常用的塑料吸管，培養皿及培養液等務必經消毒殺菌殺菌，開啟包裝未應用完的容器，不可以置放后再應用，金屬材料用品應髙壓殺菌或用95%乙醇引燃灼燒多次后應用。
5. 從包裝中取下塑料吸管時，塑料吸管尖部不可以碰觸露出位置，應用塑料吸管打疫苗于試管嬰兒或培養皿時，塑料吸管尖不可碰觸試管嬰兒或培養皿邊。
6. 打疫苗試品、轉種病菌務必在酒精噴燈前實際操作，打疫苗病菌或試品時，塑料吸管從包裝中取 出后及開啟試管嬰兒塞必須根據火苗消毒殺菌。
7. 接種環和針在打疫苗病菌前要經火苗灼燒所有鐵絲，必需時也要燒到環和針與桿 的相接處，打疫苗結核菌和烈性菌的接種環應在開水中燒開5min，再經火苗灼燒。
8. 塑料吸管汲取菌液或試品時，運用相對的橡皮擦頭汲取，不可立即用口吸。
二、無菌檢測間應用規定
1、無菌檢測間通往外邊的窗子應是雙層中空玻璃，然后密封性，不可隨便開啟，并下設與無菌檢測 間尺寸相對的緩存間及移門，另下設0.5-0.7平米的小窗，以便進到無菌檢測間后傳送物件。
2、無菌檢測間內要清潔，工作中完用2%-3%煤酚皂水溶液消毒殺菌，擦洗設備工作臺，不可儲放與試驗不相干的物件。
3、無菌檢測間應用前后左右應候門關嚴， 開啟紫外燈，如選用房間內懸吊訓練紫外燈消毒殺菌時，需30W紫外燈，間距在1.0m處，直射時間許多于30min，應用紫外燈，應留意不可立即在紫外光下實際操作，以防造成損害，led燈管每過半個月要用乙醇藥棉輕輕地擦洗，去除上邊塵土和油污，以降低紫外光透過的危害。
4、解決和打疫苗食品類標本采集時，進到無菌檢測間實際操作，不可隨便進出，如必須傳送物件，可根據小窗傳送。
5、在無菌檢測間內如必須裝空調時，則需有過濾系統。
三、消毒滅菌規定
微生物檢測用的玻璃容器、金屬材料用品及培養液、被環境污染和打疫苗的塑造物等，務必經滅菌側后方能應用。
（一）空氣干燥和寒濕髙壓蒸汽鍋滅菌方法
1、滅菌前提前準備
（1）全部必須滅菌的物件最先應清理晾曬，玻璃容器如塑料吸管、培養皿用包裝紙盒嚴實，如 用金屬材料筒應將上邊通氣口開啟。
（2）裝培養液的三角形瓶蓋，用紙包裝好，試管嬰兒蓋好蓋，針管須將管芯抽出來，用沙布包 好。
2、裝放
（1）干熱滅菌器：裝放物件不能過擠，且不可以觸碰箱的一壁。
（2）大中型髙壓蒸汽鍋：：置放滅菌物件各自捆扎好，立即放進消毒筒內，物件中間不可以 過擠。
3、機器設備查驗
（1）密封門的電源開關是不是靈便，橡皮圈有沒有毀壞，是不是整平。
（2）查驗氣壓表蒸汽排盡時是不是滯留在回零，關緊門和蓋，通蒸汽或加溫后，觀查是式壓力鍋或立柱式工作壓力蒸汽滅菌器的應用應按以下流程開展：
①手提壓力鍋在行為主體內添加3L冷水，立柱式壓力鍋放水16L（多次重復使用時要將水 量補充，水變渾濁需拆換）.
②手提壓力鍋將機蓋上的排汽管插進消毒桶內腔的方鋼管中（無塑料軟管或塑料軟管生銹裂開的滅菌器不可應用）。
③蓋好機蓋扭緊，勿使漏汽；置滅菌器于火災上加溫，立柱式壓力鍋通上開關電源，并開啟機蓋上的自動排氣閥放了冷氣機（水燒開后排氣管10-15min）。
④關掉自動排氣閥，使蒸氣壓升高到要求規定，并保持要求時間（按滅菌物件特性與相關狀況而定）。
⑤超過要求時間后，對需干躁的物件，馬上開啟自動排氣閥排出來蒸汽，待工作壓力修復到臨時，大自然水冷卻至 60℃后打開表蓋取放，若為液體物件，不必開啟自動排氣閥，而應先將鍋除去熱原，待大自然水冷卻，工作壓力修復至零，溫度降至60℃下列再打開表蓋取放，防止忽然緩解壓力液體強烈燒開或器皿工程爆破。（3）立式壓力鍋蒸汽滅菌器的應用按以下流程開展：
①關嚴鍋門，開啟旁通閥，將蒸汽導入隔層開展加熱，隔層內強冷空氣經阻氣器全自動排出來。② 隔層超過預訂溫度后，開啟鍋室旁通閥，將蒸汽導入鍋室，鍋房間內強冷空氣經鍋室阻氣器全自動排出來。
③待鍋室超過要求的工作壓力與溫度時，調整旁通閥，使維持勻速運動。
④大自然或人工服務減溫至60℃再開關門取放，不可應用迅速排出來蒸汽法，防止忽然降血壓，液體強烈燒開或器皿工程爆破。
⑤應用全自動系統控制式工作壓力蒸汽滅菌器，在擺好物件關嚴門后，應依據物件類型按 動相對電源開關，便于按規定程序流程全自動開展滅菌，滅菌時務必運用附屬儀表盤紀錄溫度與時間以備查簿，實際操作規定應嚴格執行生產廠家使用說明開展。
5、滅菌溫度與時間
（1）干熱滅菌器滅菌溫度160℃，1.5-2h。
（2）工作壓力蒸汽滅菌 鍋滅菌溫度與時間。
（二）間歇性滅菌方法
1、滅菌方法系運用不加壓力的蒸汽滅菌，一些化學物質經髙壓蒸汽滅菌非常容易毀壞，能用此法滅菌。
（1）將欲滅菌物件放置鍋內，蓋上機蓋，開啟出水口，使器內余水放盡。
（2）關掉出水口，開啟進氣門，依據必須消毒10～20min。（3）滅菌結束關掉進氣門，取下物件待冷至室內溫度溫度，放進37℃溫箱留宿，隔日仍按所述方式消毒，這般多次，就能超過滅菌目地。
2、血細胞凝結器使用說明，培養液中帶有血細胞或生雞蛋獨特成分時，因高燒會毀壞其營 培養份，故用超低溫，可讓血細胞凝結，又可超過滅菌目地。
（1）在應用該法滅菌的血細胞等預包裝時，需嚴格執行無菌操作，試管嬰兒、培養皿也經滅菌后應用。
（2）將培養液按規定使成斜坡或高層住宅，加滿水后，接好開關電源，提溫75～90℃1h滅菌，放37℃溫箱留宿，再這般滅菌多次。
3、燒開消毒：能用煮鍋或燒開消毒機，水燒開后再煮5～15 min，也可在水里添加2%石炭酸燒開5 min，添加0.02%室內甲醛，80℃煮60 min均可超過滅菌目地， 但采用 燒開消毒的增消劑時， 應留意對物件的腐蝕。
4、滅菌解決：滅菌后物件，按一切正常狀況已屬無菌檢測，從滅菌器中取下應認真仔細置放，以防再一次環境污染。（1）物件取下，隨后查驗包裝的一致性，若有毀壞或棉塞脫下，不能做為無菌檢測物件應用。（2）取下的物件，若為包裝有顯著的水侵者，不能做為無菌檢測物件應用。
（3）培養液或實驗試劑等，應查驗是不是合乎超過滅菌后的顏色或情況，未超過者應廢料。
（4）開閉式器皿，在取下時要將圓孔篩關掉。
（5）取下的物件墜落在地或誤放不干凈的這棟，或粘有水液，均視作遭受環境污染，不能做為無 菌物件應用。
（6）取下的及格滅菌物件，應儲放于儲物間或防污柜里，禁止與未滅菌物件混存。
（7）凡屬及格物件，應標著滅菌時間及有效期。
（8）每次滅菌解決進行后，紀錄滅菌產品名、總數、溫度、時間、作業者。
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