利用紫外引導的開放操作純化策略對天然產物提取物進行制備
應用效益
本應用文獻介紹了通過開放操作型純化系統來幫助化學師簡化原料提取物純化方法選擇的技術。與一種用于各種提取物的通用方法相反，簡單的方法選擇標準（基于薄層色譜分析）使分離方法可根據具體的提取物量身打造。這使化學師可減少進行再分析和再純化步驟的次數；最終加快整個純化過程的速度。
沃特世的解決方案
基于組件的制備型HPLC模塊
MassLynx?軟件
FractionLynx?和開放操作型應用管理程序
基于OBD?技術的SunFire? C18制備柱
關鍵詞
五味子、肉桂、野葛、開放操作、制備型色譜、FractionLynx應用管理程序
引言
從植物材料中提取藥用活性化合物可通過多種不同的方法得以實現。最終，化學師得到一種包含可能活性化合物并混有其他非活性成分的原料提取物。提取后，下一個步驟是對那些目標化合物進行純化或分離。制備型液相色譜多用于完成這項任務。可能被提取的化合物具有較大的差異性，這樣進行一次充分純化需要使用不同的色譜方法才能達到有效分離。因此，能為化學師提供多種方法的開放操作型液相色譜系統是值得擁有的。分析方法在柱大小、運行時間、梯度條件、溶劑、改性劑和其他變量方面可有所改變。這些選項使化學師難于選出適用于其提取物的最佳方法并會拖延目標化合物的分離和開發進程。
為幫助每位化學師簡化對其提取物選擇適當首試方法的過程，本文介紹了一臺使用簡單方法選擇標準（基于薄層色譜分析）的開放操作系統。
通過使用為其提取物量身打造的分離方法，化學師能更好地獲得純度更高的化合物。與對所有提取物使用一種通用方法相反，化學師通過選擇適當的方法，可從根本上減少進行再分析和再純化步驟的次數，進而最終加快了整個過程的速度。
實驗
樣品和提取
本試驗對三種不同的植物材料進行了提取： 五味子粉（Schisandra Chinenis）、肉桂片（CinnamomumZeylanicum）和野葛根粉末（Pueraria lobata）。將10克干樣品加入至50 mL、體積比為60:40的甲醇/水混合液后，振蕩1小時。對提取物進行離心；之后直接使用離心后的清澈提取液。未嘗試對提取過程進行優化。
薄層色譜（TLC）
提取物使用正己烷和乙酸乙酯的混合液在5 x 20 cm的TLC硅膠板上（Partisil LK6F硅膠60A及熒光指示劑，英國梅德斯通市沃特曼公司）進行分離。通過將層析板暴露于紫外光下并觀察斑點而實現了樣品的可視化。比移值從這些觀察結果中得出。
制備型液相色譜
制備型HPLC分析使用一臺由沃特世2545型四元梯度模塊、2489型紫外/可見光檢測器、制備型色譜架以及基于SunFire Prep C18 OBD柱（5 μm、19 x 100 mm）的餾份收集器III組成的系統。整臺系統使用同時配備FractionLynx和開放操作型應用管理程序的MassLynx軟件進行控制。表1概述了方法參數、流動相組分和梯度條件，如第3頁所示。
結果和討論
為簡化決定“我應使用哪種分離方法”的過程，用戶必須先收集一些樣品信息。理想狀態下，將先進行一系列分析級HPLC分離，然后制備型方法根據這些結果導出、形成并按比例擴大。在很多情況下，這種復雜過程非常耗時，而且不必要。當在研究最初階段一次性處理多種提取物時，這一點尤其正確。現有一種更簡單的方法可進行基于薄層色譜的初期評估、評價所得出的結果并根據目標化合物的比移計算值設計出一種適當的制備型液相色譜方法。在本例中，提取物先通過薄層色譜進行分析，如圖1所示。用戶根據薄層色譜的分析結果可設計出一種具有特異性分離特征的方法或者使用已在HPLC系統中設計好的方法，如圖2所示。
