方法條件
SFC梯度和流速程序
對于所述的全部數據而言，100 g/分鐘的最大總流速與各種等度的改性劑程序配合使用。
質譜檢測器的條件
用于各種試驗的3100型質譜檢測器標準ESI模式使用以下關鍵參數：
毛細管電壓： 3.5 KV
錐孔電壓： 40.0 V
二級錐孔電壓： 3.0 V
射頻透鏡電壓： 0.1 V
源溫度： 150 ?C
脫溶劑氣溫度： 350 ?C
脫溶劑氣體流速： 400 L/小時
錐孔氣體流速： 60 L/小時
0.1%的甲酸-甲醇溶液用作補償液流進入質譜，以提高電離效率。
數據管理
MassLynx/FractionLynx，第4.1版
結果和討論
疊加進樣模式下的純化放大
手性分離中通用的最佳做法是利用疊加進樣模式進行樣品進樣和餾分收集，這可實現效率最大化并降低生產成本。
在含有一定雜質的復雜體系中，質譜引導的系統可以鑒定和選擇性的收集感興趣的目標化合物，并正確的忽略不需要雜質。因而，該系統對于手性化合物的SFC純化，具有高效、適用范圍廣的特點，并成為手性藥物開發的常規主流工具。
我們對質譜引導的Prep100 SFC系統進行了一定的改造，以便將該系統用于手性化合物分離純化時達到其最大效益，其中包括添加了一個專用進樣器并改變了收集床布局以容納更大的容器，從而可重復收集對映體的餾分。
層疊進樣/進樣器的啟用
Prep 100 SFC系統整合了一個沃特世疊加進樣模塊，用戶選擇“進樣類型”并輸入疊加進樣的總次數以及軟件程序中的其它相關參數，如圖1和圖2所示。以疊加進樣的模式，運行一個自定義的進樣序列，該進樣器可從單一樣品容器中抽取多份等量樣品。
未使用疊加進樣模式時，2767型樣品管理器能繼續按照“樣品列表”所定義的順序從樣品架上逐個進樣單一樣品。
圖3顯示了對一種雙峰混合物進行疊加進樣后得出的典型色譜圖。紫外和質譜對所需物質的檢測結果均是正確的，從而確保了通過紫外或質譜觸發可進行可靠而成功的餾分收集。在本例中，紫外信號用作收集觸發；必要時也可使用質譜信號。