實驗動物等級及其飼育環境的技術指標

按照《GB 14925-2001實驗動物 環境及設施國家標準》規定，實驗動物是指經人工飼育，對其攜帶微生物實行控制，遺傳背景明確或者來源清楚的用于科學研究、教學、生產、檢定以及其他科學實驗的動物。在微生物控制方面，實驗動物分為四個等級：

      一級 普通動物(conventional animal: CV)

      普通動物不攜帶所規定的人獸共患病病原和動物烈性傳染病的病原。

      二級 清潔動物(clean animal: CL)

      清潔動物除要求必須不帶有人獸共患病原和烈性傳染病病原及常見傳染病病原之外，還要求排除對科學實驗研究干擾大的病原體的動物。清潔級動物已是我國目前主要使用的質量控制等級的動物，已被廣泛地應用于生命科學研究、新藥研制和安全評價等領域的動物實驗之中，發揮了清潔級動物，易于質量控制，非實驗因素干擾少，有較好的敏感性和可重復性的優點。

      三級 無特定病原體動物(specific pathogen free animal: SPF)

      無特定病原體動物是指機體內無特定的微生物和寄生蟲存在的動物，但非特定的微生物和寄生蟲是容許存在的。故實際上是指無傳染病的健康動物。這類動物是目前國外使用最廣泛的實驗動物，它的來源，既可來自無菌動物繁育的后裔，亦可經剖胎取后，在隔離屏障設施的環境中，由SPF親代動物撫育。它不帶有對人或動物本身致病的微生物，但不能排除可經胎盤屏障垂直傳播的微生物。

      四級 無菌動物(germ free animal: GF)和悉生動物(Gnotobiotic animal: GN)

      無菌動物是指除清潔動物應排除的病原外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對科學實驗干擾大的病原。無菌動物是在無菌屏障系統中，剖腹取出胎兒，飼養繁育在無菌隔離器中，飼料、飲水經過消毒，定期檢驗，證明動物體內外均無一切微生物和寄生蟲（包括大部分病毒）的動物。無菌動物的“菌”主要是指細菌，而嚴格來說，還包括真菌、立克次氏體、支原體和病毒等微生物及各種寄生蟲。而所謂“無”卻不是絕對的，不過是根據現有的科學知識和檢查方法在一定時期內不能檢出已知的微生物和寄生蟲而已。隨著科學技術的發展，現在認為是無菌的動物或許將來可以檢出微生物和寄生蟲而不是無菌動物，因為這個“無”是相對而言的。到目前為至，尚未確立無菌動物的微生物檢定法，因此，研究者的檢定方法各式各樣，其中病毒和立克氏體的檢查尚有相當多的問題。例如，在無菌動物中供實驗室使用最多的無菌小鼠，用電子顯微鏡檢查證明，胸腺細胞中仍有存在白血病病毒的例子，因而，現在的所謂無菌動物，指動物體內外未能檢出細菌、真菌、原蟲、內外寄生蟲的動物較妥當。悉生動物也稱已知菌動物或已知菌叢動物（Anima with Known Bacterial Flora），是指用與無菌動物相同的方法取得飼養（剖腹取胎，在隔離器內飼養）、但明確的物體內所給予的已知微生物的動物，即凡含有已知的單菌（Monoxenie）、雙菌（Dixenie）、三菌（Trixenie）或多菌（Polyxenie）的動物。由于悉生動物和無菌動物一樣是放在無菌隔離器內飼養的，因此選用此種動物作實驗準確性是很高的，可排除動物體內帶有的各種不明確的微生物對實驗結果的干擾，常用于研究微生物和宿主動物之間的關系，并可按研究目的來選擇某種微生物。

      不同等級的實驗動物需要在不同等級的環境和設施中飼育，實驗動物飼育環境分為三類，即普通環境、屏障環境、隔離環境。每類環境都有嚴格的技術標準，詳見表1和表2。普通環境：該環境設施符合動物居住的基本要求，不能完全控制傳染因子，適用于飼育教學等用途的普通級實驗動物。屏障環境：該環境設施適用于飼育CL實驗動物及SPF實驗動物。進入屏障的人、動物和物品必須經過嚴格的微生物控制。空氣經低效、中效、高效過濾器進入屏障系統，結凈度達到10000級，利用空調送風系統形成清潔走廊、動物房、污染走廊、室外的靜壓差梯度，以防止空氣逆向形成的污染。空氣、人、動物、物品的走向采用單向流通路線。工作人員工作時要在淋浴后穿著無菌工作服、口罩、帽子以盡量減少和動物的直接接觸。 隔離環境：該環境設施采用無菌隔離裝置以保存無菌或無外來污染動物。隔離裝置內的空氣、飼料、水、墊料和設備均為無菌，動物和物料的動態傳遞須經特殊的傳遞系統，該系統既能保證與環境的絕對隔離，又能滿足轉運動物時保持內環境一致。該環境設施適用于飼育SPF、悉生（Gnotobiotic）及無菌（germ free）實驗動物。工作人員只能通過隔離裝置上的橡膠手套來進行飼養或實驗。物品是通過包裝消毒后，由滅菌渡艙或傳遞窗傳入；動物是經由無菌剖腹產的方法進入；進入隔離裝置的空氣，應經高效過濾，保證隔離裝置內空氣潔凈度達100級，無菌并維持正壓狀態。根據實驗需要也可維持負壓狀態，但需要配置空氣排放裝置，保證空氣排放符合標準。

表1  實驗動物繁育、生產設施環境指標（靜態）

表2 動物實驗設施（設備³）環境指標（靜態）

參考文獻

1、中華人民共和國國家標準 GB 14925-2001實驗動物 環境及設施