牛體內重組牛生長激素(rbST)快速高靈敏度檢測（一）

牛體內重組牛生長激素 (rbST) 快速高靈敏度檢測

Gaud Pinel1 ， Sandrine Roulet-Rochereau1 ， Marie-Hélène Le Breton1,2 ，
Sylvain Chéreau1 ， Fabrice Monteau1 ， Paul Silcock3 ，與 Bruno Le Bizec1
1 Laboratoire d’ Etude des Résidus et Contaminants dans les Aliments (LABERCA) ， ONIRIS ， Nantes ， France 法國 LABERCA 化學實驗室
2 瑞士洛桑雀巢公司，雀巢研究中心
3 英國曼徹斯特沃特世公司

應用優勢

牛注射了重組牛生長激素，過幾天后檢測藥物在牛體內的殘留。首次得到了明確的檢測結果，可用于此類藥物的使用監控。

■ Xevo TQ MS 的高靈敏度可準確檢測生物基質中的重組牛生長激素（ rbST ），符合 2002/657/EC 要求。
■ 方法的靈敏度高，非常適合用于在給藥幾天后檢測動物血液中痕量的殘留激素藥物。
■ Xevo TQ MS 提供重復性好的結果，且基質效應很低，這對于藥物監控計劃實施中的常規分析來說是十分重要的。

沃特世解決方案

■ ACQUITY UPLC ， Xevo TQ MS

關鍵詞

■ rbST ， reST ，生長激素，食品安全

簡介

動物性食品安全控制是政府、國際法規機構與組織的重要任務，應該在食品進入消費環節之前就對食品安全進行有效的檢測和控制。因為上市后的食品安全事件可能影響消費者信心與國際貿易。

重組牛生長激素（ rbST ），又稱為生長激素，在一些國家通常作為豬或牛的生長促進劑，將其用于乳牛可以增加牛奶產量 1,2 。然而，生長激素的使用有嚴格的法律規范，在歐盟國家是完全禁用的 3,4 。但是，這項法規的執行面臨著很大的困難，主要是因為缺乏有效的分析工具來檢測是否存在濫用該激素的情況。此分析的困難在于生長激素本身是蛋白質，且在生物基質中濃度較低，而樣品基質組成又十分復雜。至今為止，分析方法僅僅局限為酶聯免疫檢測，這個方法不能將天然存在的激素與重組激素分離開來；盡管也有其它應用報導，但都不能專屬性很強地檢測生理水平的重組牛生長激素（ rbST ） 5,6 。

直到最近才開發出了一項直接檢測生物基質中重組牛生長激素（ rbST ）的方法 7,8 ，這個方法是將重組生長激素用胰蛋白酶進行水解，然后分析生長激素專有的 N- 端肽鏈。事實上，天然激素的 N- 端氨基酸是丙氨酸，而重組激素的 N- 端氨基酸是甲硫氨酸。

此應用文章展示了使用 Waters? XevoTM TQ MS 分析注射了重組激素的動物血漿樣品中的藥物。在注射后幾天進行檢測，可清晰檢測出結果，展示了一流水平。

實驗部分

重組激素標準品

重組牛生長激素（ rbST ）標準品與重組馬生長激素（ reST ）分別購自哈勃 UCLA 醫學中心國家激素與垂體項目（美國托蘭斯）以及 Bresagen 有限公司（澳大利亞 T hebarton ）。

樣本制備

重組牛生長激素在血漿中的樣本提取、純化步驟依照文獻進行。 7,8

MS 條件

MS 系統： XEVO TQ MS
離子化模式： ESI+
毛細管電壓： 3 kV
源溫度： 150 ℃
脫溶劑溫度： 550 ℃
脫溶劑氣速： 800 L / 小時
碰撞氣流速： 0.15 mL/ 分